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        1. 上?;鄯f生物科技有限公司

          ECV-304細胞| ECV-304細胞系 培養(yǎng)步驟

          時間:2020-6-16閱讀:1417

          ECV-304細胞| ECV-304細胞系 培養(yǎng)步驟

          產(chǎn)品名稱:ECV-304細胞

          中文名稱:人膀胱癌細胞;ECV-304

          規(guī)格:T25

          供應(yīng)商:上?;鄯f生物科技有限公司

          復蘇周期:10個工作日左右

           

          培養(yǎng)步驟:

          1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

          2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

           

          1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

          1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

          2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

          3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

          4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

          PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

          2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

          方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

           

          3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

           

          PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

           

          慧穎生物是一家專業(yè)從事細胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司,擁有獨立細胞房(可隨時約定參觀),供應(yīng)胎牛血清,無血清細胞凍存液,無血清培養(yǎng)基,常規(guī)培養(yǎng)基,胰酶,雙抗,*培養(yǎng)基,STR鑒定細胞,感受態(tài)細胞等,專業(yè),專注,性價比高,是您Shou選之家。

           

          熱賣細胞:

          細胞名稱

          英文簡稱

          細胞類型

          小鼠乳腺癌細胞熒光酶標記

          4T1-LUC

          細胞系

          SD大鼠脂肪干細胞+RFP

          原代細胞-RFP

          原代細胞

          綿羊肺成纖維細胞永生化細胞

          OAR-L1

          原代細胞永生化

          奶山羊乳腺上皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人膽囊上皮細胞永生化細胞

          原代SV40永生化

          原代細胞永生化

          人肺癌細胞紅色標記

          A549-RFP

          細胞系

          人肝竇內(nèi)皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株系

          HCT-15/Taxol

          細胞系耐藥株

          人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株

          HCT-15/FU

          細胞系耐藥株

          人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細胞

          U251MG/TMZ-luc

          細胞系

          人類星形膠質(zhì)細胞瘤細胞

          U251MG/TMZ

          構(gòu)建耐藥株

          人慢性骨髓性白血病細胞阿霉素

          K562/ADR

          細胞系耐藥株

          人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤紅色標記

          U-87MG-RFP

          細胞系

          人皮膚成纖維細胞 

          HSF

          原代細胞永生化

          人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標記

          原代細胞-GFP

          原代細胞

          人臍靜脈內(nèi)皮紅色RFP標記

          HUVEC-RFP

          細胞系

          人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標記

          HUVEC-GFP

          細胞系

          人臍靜脈內(nèi)皮

          HUV-EC-C

          細胞系

          人前庭鞘膜瘤細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人乳腺癌阿霉素耐藥細胞株

          Mcf-7/adr

          細胞系耐藥株

          人乳腺癌細胞熒光素酶標記

          MCF7-luc

          細胞系

          人三陰性乳腺癌

          MDA-MB-231-luciferase

          細胞系

          人神經(jīng)母細胞瘤細胞

          SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染突變型

          細胞系

          人神經(jīng)母細胞瘤細胞

          SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染野生型

          細胞系

          人胰腺癌細胞吉西他濱耐藥株

          PANC-1/GEM

          細胞系耐藥株

          人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人胰腺腫瘤細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人胰腺腫瘤相關(guān)成纖維永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人轉(zhuǎn)移灶淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移腫瘤細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人主動脈內(nèi)皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          人子宮內(nèi)膜上皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          小鼠肺成纖維細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          小鼠附睪脂肪干細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          小鼠肝癌細胞熒光素酶標記

          HEPA1-6-LUC

          細胞系

          小鼠骨肉瘤成骨細胞

          K7M2WT-LUC

          細胞系

          小鼠腎小球系膜細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          小鼠胰腺星狀細胞永生化

           

          原代細胞永生化

          C57小鼠脂肪干細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          鴨腦微血管內(nèi)皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          鴨胚成纖維細胞永生化

          Duck embryo

          原代細胞永生化

          鴨胚肝間質(zhì)細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          羊睪丸間質(zhì)細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          湖羊瘤胃上皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          中國倉鼠卵巢細胞 CHO-K1懸浮細胞

           CHO-K1懸浮細胞

          馴化細胞系

          豬(杜洛克,萊蕪)腹部脂肪干細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          豬扁桃體上皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          豬肝星狀細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          豬骨骼肌衛(wèi)星細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          豬子宮內(nèi)膜上皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          豬鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

          兔肝臟間質(zhì)細胞永生化細胞

           

          原代細胞永生化

           

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