詳細(xì)介紹
生化試劑的一些概要:氨基乙酸
生化試劑又叫生化藥品,簡稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國防建設(shè)等多方面進行化驗分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進行任何實驗都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對生化試劑的有關(guān)知識深入了解,才能安全、順利進行各項實驗。既可保證達(dá)到預(yù)期實驗?zāi)康?,又可消除對環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:
FRA 規(guī)格: 48T/96T 人纖維連接素相關(guān)抗原
fgl2 規(guī)格: 48T/96T 人纖維介素蛋白
TAFI 規(guī)格: 48T/96T 人纖溶抑制因子
TSLP 規(guī)格: 48T/96T 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素
TSLP 規(guī)格: 48T/96T 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素
TARC/CCL17 規(guī)格: 48T/96T 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子
TI-Ag 規(guī)格: 48T/96T 人胸腺非依賴性抗原
TECK/CCL25 規(guī)格: 48T/96T 人胸腺表達(dá)趨化因子
TLa 規(guī)格: 48T/96T 人胸腺白血病抗原
BRAK/CXCL14 規(guī)格: 48T/96T 人胸腎表達(dá)趨化因子
TS 規(guī)格: 48T/96T 人胸苷酸合成酶
常用生化試劑作用: 氨基乙酸
蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
G418:一種抗生素,對幾乎所有的細(xì)胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進真核細(xì)胞基因組合適的地方后,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。
DMSO:二甲基亞砜。實驗室常用于作液體層析溶劑,同時用作測試物質(zhì)紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
曲拉通X-100:TritonX-100,用的細(xì)胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
巰基乙醇:一種強還原劑。可還原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個亞基。
甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng),被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長的作用。
DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護酶分子上的還原性基團,維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,可以加強對抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
溴酚藍(lán):pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。29、臺盼蘭:臺盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,是細(xì)胞活性染料,常用于檢測細(xì)胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個相鄰的堿基對之間,這樣在DNA復(fù)制過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測定Ca2+時,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘an酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘an酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果??梢杂们罢叽?。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強的結(jié)合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細(xì)胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹(jǐn)慎。36、6-BA:細(xì)胞培養(yǎng)中用到,細(xì)胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑??纱龠M細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂