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          兔股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

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          參考價(jià)7750
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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          • 品牌

            其他品牌
          • 廠商性質(zhì)

            生產(chǎn)商
          • 所在地

            上海市

          規(guī)格
          5×10^57750元15 瓶 可售
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          更新時(shí)間:2024-01-29 15:31:17瀏覽次數(shù):1022

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) A01X2032 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
          組織來源 股動(dòng)脈 種屬來源
          生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 鋪路石狀細(xì)胞
          兔股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠腎小球系膜細(xì)胞SV40-MES-13 (種屬鑒定)赭紅孢囊游動(dòng)放線菌Actinoplanes rutilospovangius非洲綠猴腎細(xì)胞CV-1(種屬鑒定)褶皺鏈霉菌Streptomyces plicatus人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H82(STR鑒定正確)粘帚霉屬菌Gliocladium sp.大鼠空腸膠質(zhì)細(xì)胞EGC CRL-2690(種屬鑒定)展開青霉Peni

          詳細(xì)介紹

          一、細(xì)胞基本屬性:

          細(xì)胞名稱

          兔股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

          商品貨號(hào)

          A01X2032

          組織來源

          股動(dòng)脈

          產(chǎn)品規(guī)格

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          種屬來源

          傳代特性

          根據(jù)細(xì)胞特性

          生長特性

          貼壁

          細(xì)胞形態(tài)

          鋪路石狀細(xì)胞

           

          包被條件: 

          培養(yǎng)基:原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系

          換液頻率:每2-3天換液一次

          傳代比例:

          消化液:0.25%胰蛋bai酶

          培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

          細(xì)胞簡介

          股動(dòng)脈是下肢動(dòng)脈的主干,由髂外動(dòng)脈延續(xù)而來。在腹股溝韌帶中點(diǎn)的深面入股三角。在股三角內(nèi),股動(dòng)脈先位于股靜脈的外側(cè),逐漸從外側(cè)跨到股靜脈的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窩,易名腘動(dòng)脈。

          股動(dòng)脈在腹股溝中點(diǎn)處位置表淺,可摸到搏動(dòng),是臨床上急救壓迫止血和進(jìn)行穿刺的部位。股動(dòng)脈動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞組成了動(dòng)脈內(nèi)壁,并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下,分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響血管收縮和生長。

          主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來控制和精確調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究內(nèi)皮功能失調(diào)的機(jī)理,動(dòng)脈粥樣化等疾病的發(fā)病機(jī)理以及發(fā)展新的治療方法。


          原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:

          一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。

          二、在超凈工作臺(tái)中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。

          三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

          四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。

          五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

          六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。

          七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。

          八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。

          九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。

          十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM

          漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。

          加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。

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          原代細(xì)胞使用方法:

          是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈鋪路石狀細(xì)胞,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

          客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。

          1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細(xì)胞消化

          1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

          2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

          3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

          4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

          3. 細(xì)胞收貨脫落

          1)收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;

          2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

          3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);

          4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

          5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

          4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

          因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn);包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
          公司正在出售的產(chǎn)品:
          615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

          615小鼠乳腺癌瘤株;Ca763
          615小鼠肺癌瘤株;HP615
          615小鼠乳腺癌瘤株;Ca761
          615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912
          615小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株;P615
          小鼠肝癌瘤株;H22
          615小鼠前胃癌瘤株;Fc
          KM小鼠子宮頸癌瘤株;U14
          KM小鼠子宮頸癌瘤株;U27
          C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME(Me)
          Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256
          KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422
          KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ
          T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795
          印度尼西亞醋酸桿菌Acetobacter indonesiensis
          英諾克李斯特氏菌Listeria innocua
          英諾克李斯特氏菌(無害李斯特氏菌)Listeria innocua
          嬰兒鏈球菌Streptococcus infantis
          鷹嘴豆中間根瘤菌Mesorhizobium ciceri
          熒光假單胞菌Pseudomonas fluorescens Migula
          熒光假單胞菌基因組DNAGenomic DNA from Pseudomonas fluorescens Migula
          熒光假單胞菌生物型FPseudomonas fluorescens biotype F
          癭草黃青霉Penicillium minioluteum
          應(yīng)變型念珠菌Candida auris Satoh & Makimura
          兔股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞擁擠棒桿菌Corynebacterium accolens
          蛹蟲草Cordyceps millitaris
          蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草)Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link
          尤卡表球菌Epicoccum yuccae
          油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary

           


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