產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X2028 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
組織來源 | 頸動脈 | 種屬來源 | 兔 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 長梭形細胞,不規(guī)則細胞 |
上海撫生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價 | ¥7750 |
5×10^5 | 7750元 | 15 瓶 可售 |
更新時間:2024-01-29 15:58:50瀏覽次數(shù):296
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X2028 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
組織來源 | 頸動脈 | 種屬來源 | 兔 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 長梭形細胞,不規(guī)則細胞 |
一、細胞基本屬性:
細胞名稱 | 兔頸動脈平滑肌細胞 | 商品貨號 | A01X2028 |
組織來源 | 頸動脈 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
種屬來源 | 兔 | 傳代特性 | 根據(jù)細胞特性 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 長梭形細胞,不規(guī)則細胞 |
細胞簡介 |
頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈,前者分布至頭頂部和顏面部,后者進入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。血管疾病發(fā)生一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型。因此,對動脈血管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管疾病的靶向治療方法。 |
包被條件:
培養(yǎng)基:原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
傳代比例:
消化液:0.25%胰蛋bai酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞實驗步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質。
五、大腦皮質放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM
漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人腺癌細胞;F56
人乳腺癌細胞;1590
人涎腺腺樣囊性癌細胞;ACC-2
人卵巢癌細胞;Anglne
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SK-N-SH
人T淋巴瘤細胞;HUT102
人肺腺癌細胞;SPC-A-1
人乳腺癌細胞;MDA-MB-435S
人乳腺導管癌細胞;ZR-75-30
小鼠肉瘤細胞;CCRFS-180
Hela細胞耐藥亞株;HeLa/DDP
血管平滑肌細胞;T/GHA-VSMC
大鼠腹水癌細胞;Walker/LLC-WRC256
人乳腺癌細胞;MCF7
COC1細胞耐藥亞株;COC1/DDP
改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm)
Modified Skirrow Agar
卵黃多粘菌素瓊脂平板(9cm)
Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base
BCYE-CYS瓊脂平板(9cm)
BCYE-CYS Agar
改良CCDA瓊脂平板(9cm)
Modified CCDA Agar
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂(YPD)平板
菌種保存和即用型培養(yǎng)基
兔頸動脈平滑肌細胞瓷珠菌種保存管(20支)
Strain Store Medium
Stuart培養(yǎng)基管
Stuart Transport Medium
Cary-Blair氏培養(yǎng)基管
原代細胞使用方法:
是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈長梭形細胞,不規(guī)則細胞,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。