產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X2196 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
組織來源 | 正常腦組織 | 種屬來源 | 兔 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 長梭形,不規(guī)則細胞 |
上海撫生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價 | ¥7750 |
5×10^5 | 7750元 | 15 瓶 可售 |
更新時間:2024-01-29 16:22:24瀏覽次數(shù):302
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X2196 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
組織來源 | 正常腦組織 | 種屬來源 | 兔 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 長梭形,不規(guī)則細胞 |
一、細胞基本屬性:
細胞名稱 | 兔雪旺細胞 | 商品貨號 | A01X2196 |
組織來源 | 正常腦組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
種屬來源 | 兔 | 傳代特性 | 根據(jù)細胞特性 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 長梭形,不規(guī)則細胞 |
包被條件:
培養(yǎng)基:原代雪旺細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
傳代比例:
消化液:0.25%胰蛋bai酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介 |
雪旺細胞沿神經(jīng)元的突起分布,包裹在神經(jīng)纖維上,雪旺細胞的外表面有基膜,能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子,促進受損的神經(jīng)元的存活及其軸突的再生,參與周圍神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構(gòu)成。研究表明,神經(jīng)元延伸時對與其接觸的底物是非常具有選擇性的,而且一旦與雪旺細胞接觸,神經(jīng)纖維的延伸就會嚴格限制在Bungner帶內(nèi)。 |
原代細胞實驗步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM
漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。
原代細胞使用方法:
是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈長梭形,不規(guī)則細胞,在技術(shù)部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠乳腺癌細胞;4T1
昆蟲細胞;Hi-five(BTI-TN-5B1-4)
人乳腺癌細胞;BT474
牛腎細胞;MDBK(BVDV-free)
人橫紋肌肉瘤細胞;RD
人急性淋巴白血病細胞;Kasumi-1
人乳腺癌細胞;MDA-MB-231
人骨髓瘤細胞;NCI-H929
昆蟲細胞;SDM
EB病毒感染的人外周淋巴細胞;JVM-2
倍體細胞/人胚肺成纖維細胞;2BS
昆蟲細胞;BGE1-L15B
人外周淋巴細胞;U266B1
小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4
人結(jié)腸腺癌細胞;SW48
Nitrate Saline Peptone Water Medium
改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基
Martin Agar Medium,Modified
RV沙門菌培養(yǎng)基(中國藥典)
RC Salmonella Enrichment Medium
鹽瓊脂(新藥典)
霉菌培養(yǎng)基
Mould Medium
BPLS瓊脂
BPLS Agar
兔雪旺細胞ASS瓊脂
AC肉湯
AC Broth
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(05藥典)
Bile Lactose Medium