試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測(cè)定意義: 植酸又稱肌酸、環(huán)己六醇六全-二氫磷酸鹽,它主要存在于植物的種子、根干和莖中,其中以豆科植物的種子、谷物的麩皮和胚芽中含量最高。植酸作為螯合劑、抗氧化劑、保鮮劑、水的軟化劑、發(fā)酵促進(jìn)劑、金屬防腐蝕劑等,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、油漆涂料、日用化工、金屬加工、紡織工業(yè)、塑料工業(yè)及高分子工業(yè)等行業(yè)領(lǐng)域。 測(cè)定原理: 磺基水楊酸-氯化鐵溶液顯紫紅色,在500nm下有最大吸光值。在pH6.0-6.5的環(huán)境下,植酸和鐵離子結(jié)合使溶液顏色變淡,測(cè)定吸光度的降低來(lái)檢測(cè)植酸含量。 所需的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、烘箱、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、金屬震蕩儀、蒸餾水 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 植酸含量測(cè)試盒50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS6321356 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
黑曲霉變種磷化CREB-1抗體Human TA-IgG(Trophoblast antigen-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病e抗原(HBeAg)免疫試劑盒
葡枝根霉磷化粒-巨噬集落激因子受體β抗體Human ZP-IgG(zona pellucida-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病e抗體(HBeAb)免疫試劑盒
玫瑰綠色鏈霉菌磷化N-鈣粘附分子抗體Human TA-IgG(Trophoblast antigen-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒
根瘤菌磷化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體Human CP-IgM(chlamydia pneumoniae-Immunoglobulin M) ELISA Kit人乙酰肝(HPA)免疫試劑盒
熒光假單胞磷化受體酪激c-Abl抗體Human A16-IgG(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙酰羧化合成(ACC)免疫試劑盒
金黃色葡萄球菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human MV-IgG(Measles virus-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙酰酯(AChE)抗體(IgG)免疫試劑盒
紅酵母屬9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框75抗體Human MV-IgM(Measles virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit人乙酰酯(AChE)免疫試劑盒
雙歧雙歧桿菌CD4抗體Human CVB-IgM(Coxsackievirus B-Immunoglobulin M) ELISA Kit人乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒
土曲霉血小板糖蛋白GPIb抗體Human CVB-IgG(Coxsackievirus B-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙酰(ACH)免疫試劑盒
膜醭畢赤酵母蛋白精N甲基4抗體Human ECHO-IgG(Enteric CytopathicHuman Orphan virus-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙脫氫18家族成員A1(ALDH18A1)免疫試劑盒
球毛殼菌磷化蛋白精N甲基4抗體Human ECHO-IgM(Enteric CytopathicHuman Orphan virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit人乙脫氫(ALDH)免疫試劑盒
Bacillus tequilensis磷化周期依賴性激6抗體Human HDV-IgM(Hepatitis D Virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit人乙基二免疫試劑盒
大腸桿菌磷化原癌基因CBL2抗體Human TOX-IgM(Toxoplasma-Immunoglobulin M) ELISA Kit人乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)免疫試劑盒
多色節(jié)桿菌分裂周期蛋白7抗體Human TOX-IgG(Toxoplasma-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙脫氫(ADH)免疫試劑盒
皮氏羅爾斯通氏菌磷化分裂周期蛋白25抗體Human EV71-IgG(Enterovirus 71-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙呋(AD)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型分裂周期蛋白25B抗體Human AS-IgG(anti sperm-Immunoglobulin G) ELISA Kit人胰脂肪(PL)免疫試劑盒
比目魚(yú)金黃桿菌Chryseobacterium│scophthalmum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRHLAⅡ類組織相容性抗原,DPα1鏈試劑盒基異茜草-1-
栓孔菌Trametes│sp. 質(zhì)量規(guī)格:工業(yè)級(jí)HIV-1 TAT互動(dòng)蛋白2試劑盒肌
優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質(zhì)量規(guī)格:>95%,Pract GradeHIV試劑盒伐侖克林
植酸含量測(cè)試盒50管/48樣扁 1,4-萘二甲酸透明質(zhì)酸Elisa
阿魏側(cè)耳 4-硝基-1-萘褪黑Elisa
米氏假單胞 2-羥基蒽醌褪黑受體Elisa
季也蒙假絲酵母 2-氟-5-溴吡啶-3-酸脫Elisa
克魯維畢赤酵母 苯并-2-酸脫精9緩激肽Elisa
枯草芽孢桿 1,2-Dioctanoyl-sn-glycerol脫氫表雄酮Elisa
土生類諾氏 3,4-二肼鹽酸鹽脫氧吡啶;脫氧吡啶啉Elisa
果瘡痂芽枝霉 3,5-二肼鹽酸鹽脫中胚蛋白Elisa
釀酒酵母 2-溴吡啶-5-酸頻哪酯唾液淀粉Elisa
動(dòng)球 2,4-二肼鹽酸鹽蛙皮Elisa
糖螺 硫酸鈷,一水晚期糖基化終末產(chǎn)物Elisa
不規(guī)則分枝發(fā)簇孢 (S)-縮水甘油晚期糖基化終末產(chǎn)物受體Elisa
無(wú)花果沙雷氏 2--6-晚期氧化蛋白產(chǎn)物Elisa
米堆冰川居真細(xì) 2-甲基-3-維生AElisa
薄花邊傘6-2 二乙酰乙酸乙酯維生B1Elisa