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詳細(xì)介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321141 |
商品介紹：
測定意義CA又稱枸櫞酸，廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中，是生物體內(nèi)重要的有機(jī)酸。CA也存在于線粒體基質(zhì)中，是三羧酸循環(huán)第一步反應(yīng)的產(chǎn)物，與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關(guān)。測定原理酸性條件下，檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+，在545nm處有特征吸收峰；通過測定545nm吸光值的增加，即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
23-羥基龍吉苷元英文名： Oxaloacetic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝5g
23-乙酰去氫澤瀉B英文名： Zinc sulfate, heptahydrate電子轉(zhuǎn)移黃蛋白α抗體包裝25g
23-乙酰澤瀉B；澤瀉B醋酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Potassium sodium tatrate, tetrahydrate前列腺E受體蛋白4抗體包裝5g
24-乙酰澤瀉F英文名： Biuret風(fēng)疹病糖蛋白抗體包裝1g
25(S)-魯斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基...英文名： Magnesium sulfate anhydrousEFR3A蛋白抗體包裝5g
25-脫澤瀉A;澤瀉G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Quartz sandENAH蛋白抗體包裝1g
26-脫氧升麻苷英文名： 3-AT乙基二腦病蛋白抗體包裝5g
28-O-順芷?；赘傩萝赵⑽拿?Sodium phosphate, tribasic, dodecahydrate轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體包裝10MG
28-去基-β-香樹脂英文名： Sodium phosphate, dibasic, anhydrous轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體包裝100ml
28-去基-β-香樹脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： FerrozineDNA切除修復(fù)蛋白1抗體包裝25ml
2’-乙?；锘ㄌ擒?標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Sodium acetate, trihydrate轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體包裝1g
2"-O-沒食子?；鸾z桃苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Thidiazuron膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白2抗體包裝25g
3"-O-基表沒食子兒茶沒食子酯英文名： Iodine膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮谷運(yùn)載蛋白)包裝5g
3',4',5',5,7-五氧基黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： ADA, Alcohol dehydrogenase 內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2抗體包裝1g
3',4',7-三羥基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Tween-80嗜性粒陽離子蛋白抗體包裝5g
ATCC16371資源名稱: 紅色紅曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>99,USP,BR,可用于培養(yǎng)胎盤蛋白13試劑盒三七皂苷R1;Notoginsenosi
堿菌Alcaligenes│aquatilis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胎盤催乳試劑盒松蘿;(+)-Usniacin
魏登施泰芽孢桿菌Bacillus│weihenstephanensis 質(zhì)量規(guī)格：含量大于98.5%胎兒血劑盒肉蓯蓉苷A;Cistanoside A
檸檬酸（CA）含量測試盒50管/48樣大麗輪枝霉 1,3-二甲基-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羧酸Ⅰ型膠原氨基末端肽Elisa
魯氏接合酵母 2-溴-5-Ⅰ型膠原原羧基端交聯(lián)肽Elisa
枯草芽孢桿 3-氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯雙解絲蛋白1Elisa
白鮑魚菇 二甲醋酸酯原顆粒膜糖蛋白Elisa
米曲霉 4--2,6-二氟苯甲黑轉(zhuǎn)鐵蛋白Elisa
稀奇鏈霉 4-三氟甲基-2-羥基喹啉強(qiáng)啡肽A1-13Elisa
白色假絲酵母* 2,3,5-三-4-吡啶甲分泌型卷曲相關(guān)蛋白4Elisa
小青霉 5-嘧啶甲IgG1 Fc片段Elisa
薄層 3,5-二甲苯新蝶呤Elisa
細(xì)疣籃狀 4-溴-3-白三烯A4Elisa
亮白曲霉 1-Cbz-吡咯烷巨噬激1Elisa
金龜子綠僵 2,4,6-三苯異酸酯血管內(nèi)皮生長因子受體3Elisa
蠟狀芽孢桿 1-(2-溴乙基)-3-氟苯胃饑餓Elisa
折疊馬賽 1-甲基吡唑-3-甲酸尿香草杏仁酸Elisa
棘孢木霉 5-甲基吡唑-3-甲酸甲酯油酰乙 Elisa
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