公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對(duì)生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。 測(cè)定原理: TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過(guò)葡萄糖氧化酶法測(cè)定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。 需自備的儀器和用品: 分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
茯苓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Polydatin電壓門控性通道蛋白亞基kv6.1抗體包裝100g
茯苓新A英文名: 1-Octadecanol電壓門控性通道蛋白亞基KV6.3抗體包裝25g
浮萍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Octadecanol磷化內(nèi)流通道蛋白KCNJ1抗體包裝100mg
干蟾皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ruxolitinib (INCB018424)鈣激活通道蛋白KCNT2抗體包裝500mg
干姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: MK-1775內(nèi)流通道蛋白Kir5.1抗體包裝1g
甘草(甘草)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: PD-184352 (CI-1040)磷化內(nèi)流通道蛋白Kir5.1抗體包裝5g
甘草(脹果甘草)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Deoxy-D-glucose磷化ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體包裝100mg
甘草查爾 A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Candesartan電壓門控通道蛋白KVβ.2抗體包裝500mg
甘草查爾B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: INCB018424) phosphate電壓門控性通道蛋白Kv1.4抗體包裝1g
甘草次(α型),18alpha-甘草次(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: SB-1317,TG-02電壓門控性通道Kv1.6抗體包裝25g
甘草次(β型),18beta-甘草次(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Azilsartan磷化通道蛋白DRK1抗體包裝5g
甘草英文名: Azilsartan電壓門控性通道Kv2.2抗體包裝100g
甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ivermectin驅(qū)動(dòng)蛋白家族蛋白3抗體包裝25g
甘草(左旋)英文名: SB-431542驅(qū)動(dòng)蛋白2抗體包裝25g
甘草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: MirabegronKIAA1522蛋白抗體包裝5g
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,油狀抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體試劑盒L-谷酰;L-Glutamine
: 2453資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)抗異亮酰tRNA連接,質(zhì)試劑盒L-;Glutathione
德巴酵母Debaryomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)抗異亮tRNA連接,線粒體試劑盒L-胱;L-Cystine
海藻糖合成酶(TS)測(cè)試盒50管/24樣扣囊復(fù)膜孢酵母 二甲基膦乙酸芐酯1-3-β-D葡聚糖Elisa
宇佐曲霉 2-溴-5-苯α酮戊二酸Elisa
黑曲霉 4--3-苯脂肪酸Elisa
枯草芽胞桿 4-(正丁氧基)苯乙酮維生D結(jié)合蛋白Elisa
盔狀畢赤酵母 4-氧基苯甲脫氧核糖核酸ⅡElisa
大腸埃希 5-溴-3-硝基-2-基吡啶乙酰Elisa
嗜冷生孢八疊球 1-芐基-3-羥甲基吡咯烷紫紅色壞死病PV-1Elisa
發(fā)根土壤桿(發(fā)根植物單胞)(現(xiàn)1) 環(huán)甲脒鹽酸鹽二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移Elisa
灰毛青霉 N-Boc-γ-氨基丁酸2,3-β葡聚糖Elisa
褐黃木耳(琥珀木耳) Boc-D-4-苯T2Elisa
Paenibacillus thailandensis 3--2-吡啶甲酸核糖核酸Elisa
柄籃狀 2,3-二花色苷3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移Elisa
巨大芽孢桿 四羥鋁鋯糖基轉(zhuǎn)移Elisa
解淀粉芽孢桿 2-(乙氧基亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸乙酯花色苷?;D(zhuǎn)移Elisa
雞油 鹽酸萘哌地爾甲基轉(zhuǎn)移Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。