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        1. 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

          Easy-Lowry蛋白定量試劑盒說明書

          時(shí)間:2020-10-15閱讀:932
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          Easy-Lowry蛋白定量試劑盒說明書

          Easy-Lowry Protein Assay Kit

          Easy-Lowry蛋白定量試劑盒

           

          目錄號:K2341

          保存:BSA 標(biāo)準(zhǔn)品:2-8℃

          其  它 組  分:室  溫

           組分說明

           

          Cat. No.                    K2341

          Kit Size                    1000 次/微孔,50 次/試管

          試劑 A                        50 ml

          試劑 B                        25 ml

          BSA 標(biāo)準(zhǔn)品 (2 mg/ml)     2 ml

           

          產(chǎn)品簡介

           

              Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是一種操作簡便快捷的 Lowry 法蛋白定量試劑盒,可用于多種不同緩沖系統(tǒng)以及各種不同蛋白質(zhì)的定量檢測。Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是在 Improved-Lowry 蛋白定量試劑盒基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化改良的產(chǎn)品,其保留了Improved-Lowry 抵抗干擾能力較強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),并進(jìn)一步簡化了操作步驟,減少了檢測時(shí)間,并且能得到與mproved-Lowry 蛋白定量接近的定量結(jié)果,其檢測范圍為 0-2000 μg/ml。

           注意事項(xiàng)

           1.  本產(chǎn)品可以采用分光光度計(jì)(試管檢測法)或者酶標(biāo)儀(微孔檢測法)測定蛋白濃度。

           2.  建議每次測定蛋白樣品時(shí),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。

           3.  BSA 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液需與待測樣品的稀釋液一致(可用 1×PBS 或 0.9%生理鹽水稀釋)。

           4.  如待測樣品中含較多的干擾物質(zhì)(具體見附表 1),可采用 Bradford 法蛋白定量試劑盒(K0013)或其他蛋白定量產(chǎn)品。  

           

           操作步驟

           1.  稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品:用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品。

           管號    稀釋液用量(μl)BSA標(biāo)準(zhǔn)品用量(μl)     BSA標(biāo)準(zhǔn)品終濃度(μg/μl)

                                                                      

          A                  0                 200                       2

          B                 200                200                       1

          C                 200          200(從B管中?。?              0.5

          D                 200          200(從C管中取)              0.25

          E                 200          200(從D管中?。?             0.125

          F                200                 0                         0(空白)

           2.  稀釋試劑 B:將試劑 B 用去離子水稀釋 8 倍混勻待用。

           3.  定量檢測:

           3a.  試管檢測法(蛋白濃度檢測范圍:0-2 μg/μl)

           1)按上表,將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各 200 μl分別加到作好標(biāo)記的試管中。

           2)向各試管中加 1 ml 試劑 A 迅速振蕩混勻,室溫準(zhǔn)確放置10分鐘。

           3)向各試管中加入4 ml 稀釋過的試劑 B,迅速在渦旋儀上混勻,室溫靜置30分鐘。

           4)用分光光度計(jì)測定750 nm下的吸光度值。

           5)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的蛋白濃度。

           3b.  微孔檢測法(蛋白濃度檢測范圍:0-2 μg/μl)

           1)按上表,將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各 5 μl 分別加到作好標(biāo)記的 96 孔板微孔中。

           2)向各微孔中加 50 μl 試劑 A,迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻,室溫準(zhǔn)確放置 10 分鐘。

           3)向每孔中加入 200 μl 稀釋過的試劑 B,迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻,室溫靜置 30 分鐘。

           4)用酶標(biāo)儀測定 750 nm 下的吸光值。

           5)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的蛋白濃度。

           

          注意:

           

          1)建議以去除背景值后的吸光值讀數(shù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

          2)由于操作誤差導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品讀數(shù)嚴(yán)重偏離線性曲線的應(yīng)舍去。

          3)未知樣品濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中計(jì)算得出,  實(shí)際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。

          4)如果得到的蛋白濃度不在檢測范圍內(nèi),請重新稀釋樣品后再次測定。  

           

                                    附表 1.干擾物附表

           

              化合物               耐受濃度                化合物               耐受濃度

                                    緩沖液                               去垢劑及變性劑

              磷酸鉀                0.03 M           去氧膽酸鈉               0.0625%

              甘氨酸               0.25 mM             CHAPS              1 mM

              HEPES              2.5  μM            辛葡糖                 干擾

               MES               25  μM              SDS               1.25%

              MOPS               25  μM          Triton X-100          0.25%

            Na +-檸檬酸                 2.5  μM          糖類

                

              PIPES              5  μM             葡萄糖               30 mM

              磷酸鈉               0.25  μM             蔗糖               10  μM

              螯合劑

                TES               1 mM

                Tris             250  μM             EDTA             125  μM

                                     鹽類       EGTA               干擾

                                                             還原劑

              硫酸銨                28  μM

               NaCl              30  μM           β-巰基乙醇              1.75mM

               尿素                200  μM             DTT              50  μM

                                                              其他

                                    極性化合物

               丙酮                 1.25%            丙烯酰胺             1.25 mg/ml

              DMSO                6.20%              DNA            190  μg/ml

               乙醇                12.50%              脂類                25mM

          1,2-亞乙基二醇               0.25%           兩性電解質(zhì)                 干擾

               甘油                  25%             中性 TCA           12.5 mg/ml

           

           

          實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

           

          免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          試劑盒免費(fèi)代檢測

          實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

           

          透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

          核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)

          RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做

          酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

          雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

          喹諾酮類快速檢測試劑盒

          組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

           

          染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

           

          多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn)

          免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          ATP/ADP檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          蛋白相互作用分析

          堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          PKC活性檢測實(shí)驗(yàn)

          非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn)

          (Label-free)

           

          DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

          端粒酶活性檢測實(shí)驗(yàn)

          細(xì)胞生長曲線的測定

          掃描電鏡服務(wù)

          NF-KB p65活性檢測實(shí)驗(yàn)

           

          慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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