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無菌室的要求
1.工作室應矮小、平整,面積只需4米2左右,高2.2―2.3米,內(nèi)部裝修應平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應用不透水之材質(zhì),便于擦洗及殺菌
2.室內(nèi)采光面積大,從室外應能看到室內(nèi)情況。
3.為保證無菌室的潔凈,無菌室周圍需設(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無菌室。
4.無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ,其電源開關(guān)均應設(shè)在室外。
5.無菌室與緩沖間進出口應設(shè)拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應錯開,以免空氣對流造成污染。
6.無菌室的使用與管理
(1) 無菌室應保持清潔整齊,室內(nèi)僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等。不要放與檢測無關(guān)的物品
(2) 室內(nèi)檢驗用具及凳桌等保持固定位置,不隨便移動。
(3) 每2―3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣,zui后紫外燈殺菌半小時
(4) 定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況,細菌數(shù)應控制在10個以下,發(fā)現(xiàn)不符合要求時,應立即*消毒滅菌。無菌室無菌程度的測定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(平板直徑均9厘米),置無菌室各工作位置上,開蓋曝露半小時,然后倒置進行培養(yǎng),測細菌總數(shù)應置37℃溫箱培養(yǎng)48小時;測霉菌數(shù)則應置27℃溫箱培養(yǎng)5天。細菌霉菌總數(shù)均不得超過10個為 。
(5) 無菌室殺菌前,應將所有物品置于操作之部位(待檢物例外),然后打開紫外燈殺菌30分鐘,時間一到,關(guān)閉紫外燈待用
(6) 進入無菌室前,必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。
(7) 操作應嚴格按照無菌操作規(guī)定進行,操作中少說話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。
器材及場所的滅菌消毒
微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理,不同的對象采用不同的處理方法
1. 高壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等,置高壓殺菌鍋內(nèi),一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應分別處理
2. 火焰滅菌: 接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌
3. 高溫干燥滅菌: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃滅菌2小時
4. 一 般消毒: 無菌室內(nèi)的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌,必須用其他方法進行消毒處理,采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒,工作人員的手也用此法進行消毒
5. 空氣的消毒: 開啟紫外燈照射30―60分鐘 即可。
操作要領(lǐng)
準備工作
1. 先進行無菌室空間的消毒,開啟紫外燈30―60分鐘
2. 檢驗用的有關(guān)器材, 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒
3. 操作人員必須將手清洗消毒,穿戴好無菌工作衣、帽和鞋,才能進入無菌室
4. 進入無菌室后再一次消毒手部,然后才進行檢驗操作
操作過程注意事項
1. 動作要輕,不能太快,以免攪動空氣增加污染;玻璃器皿也應輕取輕放,以免破損污染環(huán)境
2. 操作應在近火焰區(qū)進行。
3. 接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒,灼燒時先通過內(nèi)焰,使殘物烘干后再灼燒滅菌
4. 使用吸管時,切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作。
5. 觀察平板時不好開蓋,如欲沾取菌落檢查時,必需靠近火焰區(qū)操作,平皿蓋也不能 大開,而是上下蓋適當開縫。
6. 進行可疑致病菌涂片染色時,應使用夾子夾持玻片,切勿用手直接拿玻片,以免造成污染,用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒,然后再洗滌。
7. 工作結(jié)束,收拾好工作臺上的樣品及器材,zui后用消毒液擦拭工作臺。
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