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ELISA實(shí)驗(yàn)樣本處理的注意事項(xiàng)
閱讀：380 發(fā)布時(shí)間：2024-6-4ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等，不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理辦法是不一樣的。試驗(yàn)樣本的處理可謂是ELISA試驗(yàn)的關(guān)鍵過(guò)程之一，所以科研朋友一定要多加注意。下面就給大家詳細(xì)說(shuō)說(shuō)！
一、均質(zhì)
①安排樣本：肉、肝食品類切細(xì)，用絞肉機(jī)重復(fù)絞碎，混合均勻。
②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細(xì)，用均質(zhì)器均漿；質(zhì)料外表較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充沛混勻。
④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去外表的水分，取食用部分。
二、振動(dòng)提取
將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中，振動(dòng)，使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充沛觸摸以深入到樣本安排內(nèi)部，提取待測(cè)組分。
①振動(dòng)辦法：振動(dòng)器上進(jìn)行上下、往復(fù)式振動(dòng)、手搖式上下振動(dòng)。
②在安排樣本中參加有機(jī)溶劑之間提取時(shí)，ELISA試劑盒應(yīng)邊加邊振動(dòng)，防止安排凝結(jié)成團(tuán)，不利于提取。
三、乳化現(xiàn)象
在用有機(jī)溶劑提取過(guò)程中，假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象，處理的辦法有：
①用細(xì)頭輕輕的拌和，損壞乳化后，再重復(fù)離心。
②再參加適量的提取劑，重新振動(dòng)。注意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。
四、濃縮
因?yàn)閮艋^(guò)程中引進(jìn)的溶劑，可能會(huì)降低待測(cè)組分的濃度或者不適宜直接剖析，需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理過(guò)程中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈?，再用?fù)溶液溶解枯燥殘留物。
濃縮辦法：氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。
請(qǐng)注意：
①在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質(zhì)攪擾。
②在吹樣本時(shí)，針頭應(yīng)在液面上空，防止與樣本觸摸，防止發(fā)生交叉污染。
③樣本吹干后應(yīng)立即取下，防止吹的時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)，影響zui終檢測(cè)結(jié)果。
④不同的藥物，吹干后樣本的保質(zhì)期不同，ELISA試劑盒提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
五、凈化
經(jīng)過(guò)提取的待測(cè)組分中一般含有一些會(huì)攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或者是含有與待測(cè)物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測(cè)組分與雜質(zhì)別離的過(guò)程，咱們稱為試劑盒中樣本的凈化。在咱們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到常見(jiàn)的凈化是：液液分配法。比方：用復(fù)溶液溶解枯燥殘留物之前先參加適量的正己烷，在參加正己烷和復(fù)溶液渦動(dòng)后假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象，能夠60℃水浴加熱，至乳化現(xiàn)象消失或削弱后，加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。