上海源葉生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: S30260異硫氰酸胍,30259鹽酸胍,嗜熱菌蛋白酶 |
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- 郵編:
- 200433
- 網(wǎng)址:
- www.shyuanye.com
參考價 | 面議 |
- 型號 YY10594
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
- 所在地 上海市
更新時間:2024-06-27 08:51:38瀏覽次數(shù):325
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"T4 DNA連接酶
別名:T4 DNA Ligase
規(guī)格:BR,1u/ul,帶PEG
包裝:LC200u
貨號:YY10594
CAS號:
保存條件:
產(chǎn)品詳細資料如下:
英文名稱:T4 DNA Ligase
CAS號:9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:1u/ul(200CEU/ul)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液:50%(w/v)聚乙二醇4000
抑制劑:當反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:聚乙二醇(PEG)可極大地增加平末端DNA的連接效率,PEG4000在反應(yīng)體系中的推薦濃度為5%(w/v);T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時,連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:科研、實驗。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復;連接酶介導的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態(tài)性
貯存條件: -20°C貯存
相關(guān)試劑如下:
T4 DNA連接酶/T4 DNA Ligase/ BR,5u/ul,帶PEG 200u
T4 DNA連接酶/T4 DNA Ligase/ BR,30u/ul HC1000u
末端轉(zhuǎn)移酶/TDT/9027-67-2 BR,20u/ul 500U
5´-核苷酸酶/5′-NT/9027-73-0 BR,200u/mg 100U
5-溴-4氯-3-吲哚N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/X-GalNAc/129572-48-1 超純,98% 25毫克
對硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷/PNPG/3767-28-0 生物技術(shù)級,99% 1克
鄰硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷/ONPG/19887-85-5 BR,98% 1克
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷/OGP/29836-26-8 試劑級,98% 250毫克
對硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-galactosaminide/14948-96-0 BR,98% 250毫克
復合蛋白酶/Compound proteinase/ BR,120u/mg 5克
谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶/TG/80146-85-6 BR,1.5u/mg 2U
試劑專業(yè)供應(yīng)商-上海源葉生物科技有限公司,www.shyuanye.com。產(chǎn)品種類齊全,*!
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