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上海源葉生物科技有限公司
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吸光和發(fā)光組織樣品的常用測(cè)量參數(shù)
2012-3-3 閱讀(1084)
像素是顯微圖像分析系統(tǒng)的zui小測(cè)量單位，通過(guò)它我們不僅能夠得到待測(cè)范圍內(nèi)的幾何形態(tài)信息，如面積、周長(zhǎng)和直徑等等，還可根據(jù)樣品是否能夠吸光或發(fā)光來(lái)測(cè)量其物質(zhì)的總含量。在組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)中常用熒光素來(lái)標(biāo)記物質(zhì)，使被測(cè)量物質(zhì)產(chǎn)生有色熒光，從而進(jìn)行分析。此外，在原位雜交技術(shù)中，采用放射自顯影的標(biāo)本也可以作為發(fā)光組織細(xì)胞樣品使用顯微圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析。
（一）眼光組織細(xì)胞樣品的測(cè)量
對(duì)于吸光組織細(xì)胞樣品，圖像分析系統(tǒng)至少能以下列三種參數(shù)來(lái)表述細(xì)胞待測(cè)物質(zhì)的計(jì)量結(jié)果：
1．積分光密度（integrated optical density，IOD），又稱積分吸光度，是被測(cè)量范圍內(nèi)各像素吸光度的總和，表述測(cè)量范圍內(nèi)各像素吸光物質(zhì)的總含量，測(cè)量范圍可為面積或體積。
2．平均光密度（average optical density，AOD），又稱平均吸光度，是被測(cè)量范圍內(nèi)各像素吸光度的算術(shù)平均值，表述被測(cè)量范圍內(nèi)各像素吸光物質(zhì)含量的平均水平，可反映此范圍的染色深淺程度。
3．平均光密度方差 反映被測(cè)量范圍內(nèi)務(wù)像素染色深淺差異的指標(biāo)，稱為平均光密度方差（variance of average optical density），是表述被測(cè)量范圍內(nèi)各像素間吸光度的離散程度。
（二）發(fā)光組織細(xì)胞樣品的測(cè)量
對(duì)于發(fā)光的組織細(xì)胞樣品，圖像分析系統(tǒng)也能以下列三種參數(shù)來(lái)表述細(xì)胞待測(cè)物質(zhì)的計(jì)量結(jié)果：
1．積分光強(qiáng)度（integrated light intensity） 是被測(cè)量范圍內(nèi)務(wù)像素光強(qiáng)度的總和．表述測(cè)量范圍內(nèi)各像素發(fā)光物質(zhì)的總含量，測(cè)量范圍也可為面積或體積。
2．平均光強(qiáng)度（average light intensity） 是被測(cè)量范圍內(nèi)各像素光強(qiáng)度的算術(shù)平均值，表述被測(cè)量范圍內(nèi)各像素發(fā)光物質(zhì)含量的平均水平，可直觀地反映此范圍的亮度。
3．平均光強(qiáng)度方差 反映被測(cè)量范圍內(nèi)務(wù)像素間亮度強(qiáng)弱差異的指標(biāo)，稱為平均光強(qiáng)度方差（variance of average light intensity），表述被測(cè)量范圍內(nèi)各像素間光強(qiáng)度的離散程度。
