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魚維生素K依賴蛋白S (VKDPS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
魚維生素K依賴蛋白S (VKDPS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
定量檢測(cè)魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中維生素K依賴蛋白S (VKDPS)的含量。
備注:標(biāo)準(zhǔn)品(1號(hào)→6號(hào))濃度依次為:400、200、100、50、25、12.5 ng/mL.
2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書操作洗板)。
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。
8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書操作洗板)。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),
10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)?/span>疊氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑。
1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
6、若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。
9、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
【操作程序總結(jié)】
準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
計(jì)算
【檢測(cè)范圍】
12.5ng/mL – 400ng/mL
【規(guī)格】
96人份/盒
【貯藏】
2
【有效期】
6個(gè)月
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