黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 上海一基實業(yè)有限公司
          中級會員 | 第14年

          18017270358

          魚類胰島素生長因子-1(IGF-1)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書

          時間:2011/5/13閱讀:1541
          分享:

          魚類胰島素生長因子-1IGF-1)定量檢測試劑盒(ELISA

          使用說明書

                                                                

          【試劑盒名稱】

          魚類胰島素生長因子-1IGF-1)定量檢測試劑盒(ELISA

          【試劑盒用途

          定量檢測魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中類胰島素生長因子-1IGF-1的含量。

          【檢測原理

          本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被魚類胰島素生長因子-1IGF-1單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物AB,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中魚類胰島素生長因子-1IGF-1濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計算樣本中魚類胰島素生長因子-1IGF-1含量。

          【試劑盒組成

           

          1

          酶標(biāo)包被板

          12×8

          7

          顯色劑A

          6mL

          2

          標(biāo)準(zhǔn)品

          0.3mL×6

          8

          顯色劑B

          6mL

          3

          20倍濃縮洗滌液

          25mL

          9

          終止液

          6mL

          4

          樣本稀釋液

          6mL

          10

          說明書

          1

          5

          特殊稀釋液

          6mL

          11

          封板膜

          2

          6

          酶標(biāo)試劑

          6mL

          12

          密封袋

          1

           

          備注:標(biāo)準(zhǔn)品(16號)濃度依次為:24、12、6、3、1.5、0.75 μg/L.

           

          需要而未提供的試劑和器材

          1、37恒溫箱

          2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

          3、精密移液器及一次性吸頭

          4、蒸餾水

          5、一次性試管

          6、吸水紙

          【操作步驟】

          1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

          2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

          3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。

          4、溫育:37水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

          5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。

          6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對照孔不加。

          7、溫育:37水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

          8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。

          9、顯色:每孔先加入顯色劑A 50μL,再加入顯色劑B 50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37避光顯色15min。

          10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

          11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

          12、計算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

          【樣本要求】

          1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。

          2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

          3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。

          【注意事項】

          1、實驗嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

          2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

          3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。

          4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

          5、本試劑盒定量范圍為0.75-24μg/L,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(0.75-24μg/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。

          6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。

          7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。

          8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。

          9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。

           

          【操作程序總結(jié)】

           

          準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

           


           

          加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37反應(yīng)30分鐘

           

          洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37反應(yīng)30分鐘

           

          洗板4次,加入顯色液A、B,37顯色15分鐘

           

          加入終止液

           

          15分鐘之內(nèi)讀OD

           

          計算

           

          檢測范圍

          0.75μg/L - 24μg/L

          【規(guī)格】

          96人份/

          【貯藏】

          2-8,避光防潮保存。

          【有效期】

          6個月

          會員登錄

          ×

          請輸入賬號

          請輸入密碼

          =

          請輸驗證碼

          收藏該商鋪

          X
          該信息已收藏!
          標(biāo)簽:
          保存成功

          (空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

          常用:

          提示

          X
          您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
          撥打電話
          在線留言
          襄城县| 阜新市| 徐闻县| 广元市| 同心县| 米脂县| 宁波市| 平原县| 阿瓦提县| 富民县| 昭通市| 河间市| 平南县| 凤庆县| 金昌市| 横山县| 博客| 建始县| 阜城县| 寻乌县| 阳信县| 阜宁县| 阿克陶县| 本溪市| 清河县| 建德市| 恩平市| 广东省| 延庆县| 九寨沟县| 广德县| 昔阳县| 宣武区| 北安市| 盱眙县| 沁源县| 林西县| 玉溪市| 武强县| 定南县| 逊克县|