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如何驗(yàn)證ELISA酶標(biāo)板可靠性?
閱讀：1163 發(fā)布時(shí)間：2021-3-10隨著科研事業(yè)的崛起，越來(lái)越多的人選擇ELISA檢測(cè)法來(lái)做實(shí)驗(yàn)，雖說(shuō)ELISA實(shí)驗(yàn)的原理及操作簡(jiǎn)單，但是由于實(shí)驗(yàn)的特殊性，各個(gè)方法也都是影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素之一。有操作員反應(yīng)：做了很多次ELISA實(shí)驗(yàn)，每次都能夠得到線(xiàn)性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致，猜可能是酶標(biāo)板的問(wèn)題，有什么方法可以快速驗(yàn)證酶標(biāo)板的可靠性嗎？
我公司實(shí)驗(yàn)技術(shù)專(zhuān)員解讀【ELISA酶標(biāo)板可靠性】的驗(yàn)證原理：
ELISA本身靈敏性很高，每次做出來(lái)的值不一樣很正常，特別是od值比較大的時(shí)候更是差別很大，但是只要不要偏差太大就好，一般偏差要求10%內(nèi)吧，好的數(shù)據(jù)是3%內(nèi)。
首先要穩(wěn)定所有的條件，不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子，如果測(cè)定不一樣，就是包被問(wèn)題或者保護(hù)劑的問(wèn)題，但這兩個(gè)都是各個(gè)試劑盒的機(jī)密，看看文獻(xiàn)里別人怎么做的。
其次每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的，這與抗原抗體反應(yīng)體系、作用時(shí)間、顯色時(shí)間等等一系列的因素有關(guān)。鑒定該ELISA體系是否可靠，關(guān)鍵的指標(biāo)是加標(biāo)回收率和稀釋線(xiàn)性，如果你懷疑的話(huà)可以做一下。
一般來(lái)說(shuō)，國(guó)外廠(chǎng)商的ELISA試劑盒是沒(méi)有問(wèn)題的。同時(shí)你還要看一下說(shuō)明書(shū)中ELISA試劑盒的靈敏度，如果樣品濃度低于該檢測(cè)下限，則無(wú)法檢測(cè)到，這是很正常的現(xiàn)象，并不是非要每個(gè)樣品都要測(cè)出值才可以。