產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
Nucleofector™ Technology
Amaxa核轉(zhuǎn)染系統(tǒng),一直被模仿,*
Amaxa細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)
簡介:Nucleofector核轉(zhuǎn)染技術(shù)
隨著系統(tǒng)生物學(xué)與交叉學(xué)科方法的應(yīng)用,要求細(xì)胞和系統(tǒng) 模型越來越接近體內(nèi)細(xì)胞的功能。這就意味著將來的細(xì)胞 轉(zhuǎn)染多數(shù)會是原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。而傳統(tǒng)的方法很難成功轉(zhuǎn) 染原代細(xì)胞。另外即使使用細(xì)胞系做為系統(tǒng)模型,傳統(tǒng)的 方法也難重復(fù)出好的轉(zhuǎn)染效率與成活率。Nucleofector 技術(shù)就從根本上解決這個(gè)問題。無論是原代細(xì)胞、干細(xì)胞 還是細(xì)胞系,它每次都可重復(fù)出很高的轉(zhuǎn)染效率。 1998年,Nucleofector技術(shù)開發(fā)成功,2001年上市,是市場 上一個(gè)有效的、非病毒介導(dǎo)的、用于原代細(xì)胞與難轉(zhuǎn)染細(xì) 胞系的轉(zhuǎn)染方法?,F(xiàn)在Lonza還在繼續(xù)不斷改革創(chuàng)新,為研 究者推出更多更好的新產(chǎn)品。
Amaxa細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)原理:
NucleofectionTM技術(shù)是利用電擊在細(xì)胞膜上穿個(gè)小孔。并且 綜合優(yōu)化了各種特定細(xì)胞轉(zhuǎn)染程序與轉(zhuǎn)染液,使得轉(zhuǎn)染物質(zhì) (如DNA、RNA等)不僅可以進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),而且可直接通過核 膜進(jìn)入細(xì)胞核。這使得細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率高可達(dá)99%。
Nucleofector技術(shù)的組成:
Nucleofector技術(shù)由Nucleofector儀器、細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑和操作 手冊組成
※ Nucleofector儀器:
1. 模塊化設(shè)計(jì),各模塊可單獨(dú)配置;
2. 核心模塊內(nèi)置各種細(xì)胞優(yōu)化的電極參數(shù),可直接選擇;
3. X模塊提供中低通量(1-16樣),中低細(xì)胞數(shù)量(約1e+5 到1e+7)轉(zhuǎn)染;
4. Y模塊提供24孔板直接貼壁轉(zhuǎn)染;
5. 96模塊提供高通量(96樣),低細(xì)胞數(shù)量(約1e+5)轉(zhuǎn)染;
6. LV模塊提供低通量,大量細(xì)胞直接轉(zhuǎn)染 (1e+8到1e+9);
※ 試劑盒:包含有轉(zhuǎn)染溶液、添加劑、用電極杯、吸管、 陽性對照質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染試劑為細(xì)胞轉(zhuǎn)染提供保護(hù),即保證了 高的轉(zhuǎn)染效率與成活率,又幫助細(xì)胞維持良好的生理功能 性狀。我們提供有一系列的優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑盒與操作手冊。
※ 數(shù)據(jù)庫與操作手冊:我們的在線數(shù)據(jù)庫提供600種以上細(xì)胞 的轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)和操作手冊。優(yōu)化的操作手冊除了操作手冊除了 操作指導(dǎo)外,還包括細(xì)胞來源、傳代、生長條件、培養(yǎng)基以 及轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)等細(xì)節(jié)技巧。
具兼容性的模塊:Nucleofector X模塊
針對不同數(shù)量級的細(xì)胞,提供不同的電極杯。
X模塊可以使用兩種不同形式的聚合材料電極,分別是如下 電極杯和電極板條
100ul電極杯
※ 新式可導(dǎo)電材料的電極杯替代了原來鋁制電極杯
※ 低通量但是一次可轉(zhuǎn)較大量的細(xì)胞 (適用于生化應(yīng)用或Western Blot實(shí)驗(yàn))
16孔20ul電極板條
※ 與96孔電極杯的板條一致
※ 中通量,低細(xì)胞數(shù)量(報(bào)告基因分析,RNAi)
可在相同的條件下轉(zhuǎn)不同數(shù)量的細(xì)胞
X模塊使用的相同材質(zhì)制成的20ul電極板條與100ul電極杯,X模塊中不同的電極模式可選用相同的電轉(zhuǎn)程序(系 統(tǒng)可自動轉(zhuǎn)化應(yīng)用于不同模塊的參數(shù),客戶無需進(jìn)行額 外操作),實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的方便性與靈活性大化。 一旦其中一種電極形式優(yōu)化好,另一種就很容易轉(zhuǎn)化好。 不同通量的電轉(zhuǎn)條件也很容易轉(zhuǎn)化。 96孔模塊的操作手冊也適用于X模塊。
貼壁轉(zhuǎn)染模塊 4D-Nucleofector Y Unit
至今為止基于電轉(zhuǎn)的方法都是要求細(xì)胞處于懸浮狀態(tài) Nucleofector進(jìn)入一個(gè)新時(shí)代,細(xì)胞可以在貼壁狀態(tài) 下直接轉(zhuǎn)染。細(xì)胞培養(yǎng)在24孔板中,插入電極板即可 完成轉(zhuǎn)染。
優(yōu)點(diǎn):
※ 細(xì)胞生長在24孔板中,直接轉(zhuǎn)染
※ 可在細(xì)胞生長的任何時(shí)期進(jìn)行轉(zhuǎn)染
※ 細(xì)胞活力好,轉(zhuǎn)染效率高可達(dá)70%
※ 與Clonetics原代動物神經(jīng)元兼容
耗材:
根據(jù)簡化試劑盒的原則,我們提供兩種轉(zhuǎn)染試劑AD1與AD2, 適用于所有細(xì)胞類型。試劑盒可按下圖的指示進(jìn)行選擇:
大量細(xì)胞轉(zhuǎn)染:LV模塊
使用4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)系統(tǒng),用于小量細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)條件,可直接放大, 用于大量細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。
LV模塊采用封閉系統(tǒng),可轉(zhuǎn)染1×107至1×109細(xì)胞。轉(zhuǎn)染的條件可使用X模塊, 以小體積進(jìn)行摸索。之后再使用LV模塊,不需要重新優(yōu)化,即可進(jìn)行大量細(xì)胞 轉(zhuǎn)染。LONZA公司已進(jìn)行過驗(yàn)證的細(xì)胞有人T細(xì)胞、CHO-S、HEK293-S和K562等。
優(yōu)勢:
※ 系統(tǒng)封閉
※ 在無菌環(huán)境下轉(zhuǎn)染多達(dá)109細(xì)胞;
※ 系統(tǒng)可放大
※ 可用小體積優(yōu)化并確定轉(zhuǎn)染條件;
※ 詳細(xì)的操作步驟
※ 在線數(shù)據(jù)庫中收錄了700多種細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)條件;
※ 操作簡單
※ 簡單的培訓(xùn)即可掌握實(shí)驗(yàn)技術(shù);
※ 軟件系統(tǒng)
※ 操作軟件符合21CFR part11的規(guī)定;
兩種規(guī)格可選:
從小體積少量細(xì)胞直接放大到大體積大量細(xì)胞
應(yīng)用:
※ 對人原代細(xì)胞進(jìn)行體外基因修飾以用于細(xì)胞治療(例如,基因編輯、生產(chǎn)CAR-T細(xì)胞);
※ 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后生產(chǎn)治療性蛋白或抗體,進(jìn)行各種質(zhì)粒的篩選;
※ 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染大量細(xì)胞后用于細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn);
96孔模塊
96孔模塊可對原代細(xì)胞和各種細(xì)胞系提供1-96通量 的實(shí)驗(yàn)條件??稍O(shè)置96個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)條件,以得到 優(yōu)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。完整的系統(tǒng)包含3個(gè)部分:
※ 4D核轉(zhuǎn)儀(Core+X模塊)來發(fā)送核轉(zhuǎn)程序
※ 96-well Shuttle Device來進(jìn)行96孔的核轉(zhuǎn)
※ 安裝96-well Shuttle Device軟件的電腦, 用來控制儀器
耗材:
※ 用于原代細(xì)胞和各種細(xì)胞系的試劑盒
※ 對于未知條件的細(xì)胞提供優(yōu)化試劑盒
優(yōu)點(diǎn):
※ 96個(gè)轉(zhuǎn)染孔可單獨(dú)設(shè)置轉(zhuǎn)染程序,完成全部核轉(zhuǎn) 只需不到5分鐘
※ 一次核轉(zhuǎn),實(shí)驗(yàn)96個(gè)不同條件,完成條件優(yōu)化
基本款:Nucleofector 2b Device
2001年推出,用于實(shí)驗(yàn)室研究的單管系統(tǒng),低通量 有效轉(zhuǎn)染質(zhì)粒、RNA等不同底物到原代細(xì)胞和難轉(zhuǎn) 染細(xì)胞系中。擁有4000篇以上的引用文獻(xiàn)。
耗材:
※ 提供50多種原代細(xì)胞,血液細(xì)胞及干細(xì)胞試劑盒
※ 5種細(xì)胞系試劑盒涵蓋了所有種類細(xì)胞系
※ cGMP試劑盒適用于蛋白生產(chǎn)應(yīng)用
訂貨信息: