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          中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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          環(huán)境監(jiān)測(cè)設(shè)備

          全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀的工作原理

          時(shí)間:2023/5/18閱讀:580
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          (Microplate Reader)是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是通過(guò)偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過(guò)顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。實(shí)際上就是一臺(tái)變相的專用光電比色計(jì)或,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。

          一、原理

               使或結(jié)合到某種固相表面,并保持其活性。使或與某種連接成酶標(biāo)抗原或,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其活性,又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相上形成的抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的后,底物被變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的。
                      

          二、酶標(biāo)儀的應(yīng)用
               酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來(lái)越廣泛,同時(shí)促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高。目前在國(guó)內(nèi)血站臨床試驗(yàn)室中酶標(biāo)儀成為ELISA測(cè)定的重要工具。在農(nóng)業(yè)中利用酶標(biāo)儀研究酚氧化酶,為開(kāi)發(fā)以該酶為靶標(biāo)的新型害蟲(chóng)控制劑提供理論依據(jù)。伏馬菌素是最近發(fā)現(xiàn)的一族主要由幾種真菌產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)相關(guān)的毒素代謝產(chǎn)物,該毒素已被世界衛(wèi)生組織列為近年來(lái)首*行研究的幾種霉菌毒素之一。因此快速、高效的檢測(cè)伏馬菌素便顯得尤為重要。在450nm或630nm的濾鏡下使用酶標(biāo)儀對(duì)微孔板進(jìn)行光學(xué)測(cè)量,可以檢測(cè)伏馬菌素的含量,在食品安全方面有著重要的應(yīng)用。生長(zhǎng)曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI。或者菌落總數(shù)的對(duì)數(shù)log CFU/ml。隨時(shí)間變化曲線,可用來(lái)展示微生物生長(zhǎng)情況和新陳代謝規(guī)律。目前通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定菌懸液時(shí)存在即時(shí)性差、操作繁瑣、易污染等缺點(diǎn),由于酶標(biāo)儀是一種快速、準(zhǔn)確、高通量的儀器,所以我們總會(huì)選擇使用酶標(biāo)儀來(lái)進(jìn)行菌懸液OD值的測(cè)定,來(lái)提高工作效率,節(jié)約時(shí)間。

                Thermofisher新推出的全波長(zhǎng)讀數(shù)儀Multiskan GO支持終點(diǎn)法、動(dòng)力學(xué)和光譜掃描測(cè)量,采用氙燈作為光源,通過(guò)*的光柵系統(tǒng)進(jìn)行波長(zhǎng)選擇,波長(zhǎng)范圍從200nm到1000nm,可以1nm步進(jìn)量進(jìn)行全光譜掃描,包括紫外和近紅外,可以自由選擇任何波長(zhǎng)。其具備微孔板和比色杯測(cè)量的雙重功能,既可作為全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀,也可作為全波長(zhǎng)分光光度計(jì)使用。


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