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β-半乳糖苷酶（β-GAL）測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：BC2580
規(guī)格：50管/24樣
測(cè)試方法：可見(jiàn)分光光度法

測(cè)定意義：                          
    β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解，此外還具有轉(zhuǎn)半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長(zhǎng)釋放儲(chǔ)存的能量，還能在正常的多糖代謝、細(xì)胞壁組分代謝以及衰老時(shí)細(xì)胞壁降解過(guò)程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解，釋放自由的半乳糖。
 

測(cè)定原理：
    β-GAL分解對(duì)-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算β-GAL活性。
 

自備用品：
    可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容：

提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入5mL 蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。

試劑二：液體15mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體80mL×1 瓶，4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)液：液體1ml×1支，4℃保存，10μmol/ml對(duì)硝基苯酚溶液。

操作步驟：

一、 粗酶液提?。?/span>

1、 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴ 個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30 次）；15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約0.1g 組織，加入1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

• 標(biāo)準(zhǔn)液的處理：用試劑二將標(biāo)準(zhǔn)液稀釋200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/ml.

二、 測(cè)定步驟：

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)400nm，蒸餾水調(diào)零。

• 樣本測(cè)定（在EP 管中依次加入下列試劑）：

充分混勻，400nm 處測(cè)定吸光值A(chǔ)，計(jì)算ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

三、 β-GAL 活性計(jì)算：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度（x）和濃度（y，nmol/ml）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，將△A帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，計(jì)算樣品生成的產(chǎn)物量（nmol/ml）。

（1） 按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg 組織蛋白每小時(shí)產(chǎn)生1nmol 對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。

β-GAL 活力(nmol/h /mg prot)=(y×V 反總)÷(V 樣×Cpr)÷T

=20×y÷Cpr

需要另外測(cè)定，建議使用本公司BCA 蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。

（2） 按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g 組織每小時(shí)產(chǎn)生1nmol 對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。

β-GAL 活力(nmol/h /g 鮮重)＝(y×V 反總)÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T

=20×y ÷W

（3） 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每小時(shí)產(chǎn)生1nmol 對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。

β-GAL 活力(nmol/h /10⁴ cell)= (y×V 反總)÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T

=0.04×y

Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.5mL；V 樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.05mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g； 500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬(wàn)；T：反應(yīng)時(shí)間，0.5h。

β-半乳糖苷酶（β-GAL）測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法訂購(gòu)說(shuō)明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

β-半乳糖苷酶（β-GAL）測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法運(yùn)輸說(shuō)明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。