目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>三羧酸循環(huán)系列>> BC0950-50T/48S琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測試劑盒 三羧循環(huán)
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號 | BC0950 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測 |
琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測試劑盒 三羧循環(huán) 琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測試劑盒 三羧循環(huán)
琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC0950
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體60 mL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 液體0.6 mL×1支 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體4mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑五 | 液體3mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑二:為易揮發(fā)試劑,用完后盡快密封,-20℃保存;
產(chǎn)品說明:
SDH(EC 1.3.5.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。SDH是線粒體的一種標志酶,位于線粒體內(nèi)膜上的一種膜結(jié)合酶,是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外,為多種原核細胞產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子。
SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸,脫下的氫通過吩嗪二甲酯硫酸(PMS)傳遞還原*(DCPIP),并且在600nm處具有特征吸收峰,通過600nm吸光度的變化,測定2,6-DCPIP的還原速度,代表SDH酶活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:
測定過程中所有試劑和樣本在冰上放置,以免變性失活。
若ΔA大于0.5,需將酶液用酶提取液稀釋,使ΔA小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
實驗實例:
取0.1g腎臟加入1mL試劑一和10uL試劑二,用冰浴勻漿器勻漿充分研磨,4 ℃ 11000g離心10min,取上清置冰上。按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A1測定-A2測定=0.82-0.681=0.139,ΔA空白=A1空白-A2空白=0.905-0.904=0.001,按樣本質(zhì)量計算酶活得:
SDH活性(U/g 質(zhì)量)=1571.111×(ΔA測定-ΔA空白)÷W=2168.13 U/g 質(zhì)量。
參考文獻:
Fattoretti P, Bertoni-Freddari C, Caselli U, et al. Impaired succinic dehydrogenase activity of rat Purkinje cell mitochondria during aging[J]. Mechanisms of ageing and development, 1998, 101(1-2): 175-182.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0710/BC0715 α-酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)活性檢測試劑盒
BC2150/BC2155 檸檬酸(CA)含量檢測試劑盒
BC0380/BC0385 *酸脫氫酶(PDH)活性檢測試劑盒