目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>離子系列>> BC4350-50T/48S組織鐵含量檢測試劑盒 離子
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號 | BC4345 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農業(yè),綜合 |
主要用途 | 組織鐵含量檢測 |
組織鐵含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號:BC4350
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
標準液 | 液體3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 試劑一:臨用前配制,取1瓶加入7.5 mL蒸餾水充分溶解,試劑一變黑后則不能使用,2-8℃保存一周;
2、 試劑二:臨用前配制,取1瓶加入375 μL冰 醋 酸,加入12 mL蒸餾水充分溶解;溶解后2-8℃保存一周;
3、 標準液:1 μmol/mL Fe3+標準液。
4、 標準溶液的稀釋:臨用前取100μL 1 μmol/mL Fe3+標準液,加入700μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.125 μmol/mL的標準溶液進行實驗,現(xiàn)用現(xiàn)配。(實驗中每管需要400μL,為減小實驗誤差,故配制大體積。)
產(chǎn)品說明:
鐵是人體必須的微量元素之一,它是血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素及其他酶系統(tǒng)的主要成分,幫助氧的運輸,促進脂肪氧化。缺乏鐵元素容易造成貧血、代謝紛亂,并影響機體的免疫功能。
技術指標:
低檢出限:0.00009449 μmol/mL
線性范圍:0.0039-0.25 μmol/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、低溫離心機、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、氯仿、冰乙酸、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿。4000g 4℃離心10分鐘,取上清。
二、測定步驟
1. 可見分光光度計預熱30min,波長調至520nm。蒸餾水調零。
2. 加樣表:
空白管 | 測定管 | 標準管 | |
蒸餾水 | 400 | - | - |
0.125μmol/mL標準液 | - | - | 400 |
樣本 | - | 400 | - |
試劑一 | 200 | 200 | 200 |
試劑二 | 400 | 400 | 400 |
混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻; | |||
氯仿(自備) | 200 | 200 | 200 |
充分震蕩混勻后室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層無機相800μL,加入1mL玻璃比色皿,于520nm立即測定吸光度,分別記為A空白管、A測定管、A標準管,計算ΔA標準=A標準管-A空白管,ΔA測定=A測定管-A空白管。空白管和標準管只需做1-2次。 |
三、組織鐵含量計算
1.按組織質量計算
組織鐵含量(μg/g 質量)=(C標準液×ΔA測定÷ΔA標準)×V提取×55.845÷W=6.98×ΔA測定÷ΔA標準÷W
2.按組織蛋白濃度計算
組織鐵含量(μg/mg prot)=(C標準液×ΔA測定÷ΔA標準)×V提取×55.845÷(Cpr×V提?。?/span>
=6.98×ΔA測定÷ΔA標準÷Cpr
C標準液:0.125μmol/mL Fe3+標準液;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V提?。禾崛∫后w積,1mL;55.845:Fe的相對分子質量,55.845μg/μmol。
注意事項:
1、 當ΔA大于0.9 時,建議將樣本用提取液稀釋后進行測定;ΔA過小時,可增加加入的樣本體積來測定。
2、 試劑一溶解變黑后則不能使用;試劑二有毒性,做好防護措施。
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