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PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料）
貨號：PC1350
規(guī)格 ：500U/1000U
濃度 ：5U/ul
保存 ：-20℃保存, 有效期少一年。
產(chǎn)品簡介 ：
Pfu DNA Ploymerase 是從克隆有 Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase 基因的大腸桿菌中表達并經(jīng)過柱純化分離出來的重組蛋白，其分子量為 90kD。由于 Pfu 酶具有 3’→5’核酸外切酶活性，它能糾正 DNA 擴增過程中產(chǎn)生的錯配，而傳統(tǒng)的 Taq 酶卻不能，其它耐熱 DNA Polymerase 如 Vent、Deep Vent、Tli、UITma 等雖具有校正功能， 但 Pfu 酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有耐熱 DNA Polymerase 中出錯率低的。 Pfu 酶無 5’→3’核酸外切酶活性，PCR 反應(yīng)中的延伸速度一般為 0.5-1kb/min，比 Taq 酶要低。Pfu 酶比 Taq 酶熱穩(wěn)定性更好，95 1 ℃ 小時仍保持90%以上的活性，對于 GC 含量很高的模板，變性溫度可以提高到 98℃而不影響其活性。Pfu 酶的 PCR 產(chǎn)物為平末端，可加 A 處理再與 T-載體連接或使用平末端克隆載體。
活性定義 ：
1 單位(U) Pfu DNA Polymerase 活力定義為在 74℃，30 分鐘內(nèi)，以活性化的大馬哈魚精子 DNA 作為模板/引物，將 10 nmol 脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。
質(zhì)量控制 ：
SDS-PAGE 檢測 Pfu DNA Polymerase 純度大于 99%； 經(jīng)檢測無外源核酸酶活性； PCR 方法檢測無宿主殘余DNA；能有效地擴增人類基因組中的單拷貝基因；室溫存放一周，無明顯活性改變。
酶貯存緩沖液 ：
50mM Tris-HCl (pH 8.2); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% glycerol；其他成份。
適用范圍 ：
用于 DNA 的高保真擴增，如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內(nèi)基因點突變的分析（SNP）和末端補平等。
建議 PCR 體系（以 50µl 反應(yīng)體系為例）
Template <0.5µg
上游引物（10µM） 1µl
下游引物（10µM） 1µl
10×Buffer（含 Mg 2+ ） 5µl
dNTP（各 2.5mM） 4µl
Pfu DNA Polymerase 0.5-1µl
ddH2O up to 50µl
注意事項 ：
1、PCR 反應(yīng)體系加樣時，后一步加入 Pfu DNA Ploymerase，整個過程宜在冰上操作。
2、取 Pfu DNA Ploymerase 做 PCR 反應(yīng)時，請用高壓滅菌處理過的吸頭。
3、10×Pfu Buffer 中含 20 mM Mg 2+ ，如 PCR 反應(yīng)需要較高 Mg 2+ 濃度，請另行加入。
4、 用Pfu酶擴增時， 引物的純度要求較高， 引物長度大于18個堿基， Tm值在55-80℃之間， 引物濃度在0.1-0.5uM之間，比 Taq 酶略高。
相關(guān)產(chǎn)品 ：
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PC2200 dNTPs Mix(10mM each)
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PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料）訂購說明：
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3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。
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PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料）運輸說明：
1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
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