目錄:北京索萊寶科技有限公司>>蛋白質(zhì)研究>>蛋白質(zhì)電泳>> P1200-25T蛋白質(zhì)電泳試劑SDS-PAGE凝膠制備試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | P1200 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 制膠試劑盒 SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 |
蛋白質(zhì)電泳試劑SDS-PAGE凝膠制備試劑盒
貨號 ：P1200-1/P1200-2
規(guī)格 ：25 塊/50 塊 SDS-PAGE 凝膠
產(chǎn)品內(nèi)容 ：
| P1200-1 | P1200-2 | 保存條件 | |
| 30%丙烯酰胺(29:1) | 100ml | 100ml×2 | 4℃，避光 |
| 1.5mol/LTris(pH8.8) | 100ml | 100ml×2 | 常溫 |
| 1.0mol/LTris(pH6.8) | 30ml | 60ml | 常溫 |
| 過硫酸銨干粉 | 1g | 2g | 干粉 4℃；溶液-20℃ |
| 10%SDS | 5ml | 10ml | 常溫 |
| TEMED | 0.8ml | 1.5ml | 4℃，避光 |
| 說明書 | 一份 | 一份 |
產(chǎn)品簡介 ：
本公司生產(chǎn)的 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒是按照經(jīng)典方法配制而成。本試劑盒提供了配制 SDS-PAGE 凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠器具和蒸餾水，即可配制 PAGE 膠。本試劑盒可配制不同規(guī)格、不同聚合度的 PAGE 膠(即聚丙烯酰胺凝膠) 約 25/50 塊。
聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,N-甲叉雙丙烯酰胺在加速劑N，N，N，N—四甲基乙二胺(簡稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(簡稱AP)或核黃素(即vitamin B2)的作用下聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠，以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳
(polyacrylamide gel electrophoresis，簡稱PAGE)
SDS－PAGE是在要電泳的樣品中加入含有SDS和β-巰基乙醇(或者DTT)的樣品處理液，SDS可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu)，β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。SDS還與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)－SDS復(fù)合物上帶有大量的負電荷，這時各種蛋白質(zhì)分子本身的電荷*被SDS掩蓋。這樣電泳時，就消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷及結(jié)構(gòu)上的差異，電泳速度只是與蛋白質(zhì)分子量有關(guān)。用本法測定蛋白質(zhì)的分子量只需根據(jù)待測蛋白質(zhì)在已知分子量的標準蛋白質(zhì)圖中的位置，就能得知分子量。
注意事項 ：
1、TEMED 和 10%過硫酸銨后加，在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在 4℃有效期為一周；TEMED 易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠 30 分鐘內(nèi)可以凝固，如溫度過低，可放 37℃溫箱凝固。灌完分離膠后，輕輕的加 1ml ddH2O 封上層，膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前，先傾去水層，再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后，放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔)，輕輕的撥出梳子，可防加樣孔變形。
2、配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同，可自行調(diào)整，主要是調(diào)整 30%丙烯酰胺的量（需要濃度×總體積/30%） ，后用水補足總體積。
配膠說明 ：
1、先在過硫酸銨干粉中加入蒸餾水或去離子水(每克過硫酸銨需加水 10ml)配置成 10%溶液，將溶液分裝成小體積后凍存于-20℃，制備凝膠時融化后使用，10%過硫酸銨溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，4℃有效期 7-30 天。
2、檢測 SDS 溶液是否澄清，若出現(xiàn)絮狀物或沉淀可放 37℃片刻溶解，不影響效果。
3、根據(jù)目標蛋白分子量大小，選取凝膠濃度，按下表配制。先配分離膠，再配濃縮膠。
| 分離膠 15% | 分離膠 12% | 分離膠 10% | 分離膠 8% | 濃縮膠 5% | |
| 總體積 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
| 30%丙烯酰胺(29:1) | 5ml | 4ml | 3.3ml | 2.7ml | 0.83ml |
| 1M Tris-HCl (PH6.8) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.625ml |
| 1.5M TrisHCl(PH8.8) | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 0 |
| 10%SDS | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
| 10%過硫酸銨 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 75ul |
| TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 7.5ul |
| ddH2O | 2.3ml | 3.3ml | 4.0ml | 4.6ml | 3.42m |
| 佳分離范圍 | 10-40kD | 12-60 kD | 20-80 kD | 30-90kD | — |
相關(guān)產(chǎn)品 ：
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蛋白質(zhì)電泳試劑SDS-PAGE凝膠制備試劑盒訂購說明：
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參考文獻：
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang，Ruo‐Lun Wei，Wei Du，Li‐Wei Zhang，Tao Du，Ya‐Dong Geng，Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:4.458 PMID:30924320
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