使用超聲波細(xì)胞破碎儀注意事項(xiàng)
1 、切記空載(一定要將超聲變幅桿插入液體樣品后才能開(kāi)機(jī),)
2、變幅桿(超聲探頭)入液體深度: 1.5Cm 左右,液面高度有30mm以上,探頭要居中,不要貼壁。超聲波是垂直縱波,插入太深不容易形成對(duì)流,影響破碎效率。
3、超聲參數(shù)設(shè)置:設(shè)置鍵好儀器工作參數(shù)(具體設(shè)置見(jiàn)說(shuō)明書(shū)),對(duì)于對(duì)溫度要求比較敏感的樣品(比如細(xì)菌)一般外面采用冰浴,或者外接循環(huán)冷卻水,當(dāng)實(shí)際溫度肯定是低于25度,蛋白核酸肯定不會(huì)變性。
1) 時(shí)間:超聲時(shí)間每次不要超過(guò)5秒 ,間隙時(shí)間應(yīng)大于或等于超聲時(shí)間,以便于熱量散發(fā)。時(shí)間設(shè)定應(yīng)以超聲時(shí)間短,超聲次數(shù)多原則,可延長(zhǎng)超聲機(jī)子以及探頭的壽命。
2) 超聲功率: 不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,功率應(yīng)在200w以內(nèi),選用2mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿選擇開(kāi)關(guān)打到相應(yīng)擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;(2MM的小探頭功率嚴(yán)禁超過(guò)350W)
3) 容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對(duì)流,提高破碎效率。例如;20ML的處理量用20ML的燒杯。
如100ml大腸桿菌樣品設(shè)置參數(shù): 超聲5秒 /間隙5秒 次數(shù)70次(總時(shí)間為10分鐘)。功率300W(僅供參考)
500ML左右的量,功率開(kāi)到500W-800W左右
4、若樣品放在1.5ml的EP管里請(qǐng)一定要將EP管固定好,以以防冰浴融化后液面下降導(dǎo)致空載
5、日常保養(yǎng):用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲
超聲波細(xì)胞破碎儀應(yīng)用范圍
1.細(xì)胞破碎/裂解
2.抽提蛋白、核酸
3.修剪DNA/RNA
4.納米技術(shù)研究
5.染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)
6.樣品均質(zhì)、乳化
7.其它樣品處理
超聲波細(xì)胞破碎儀
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