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產(chǎn)品說明

 隨機突變是闡述蛋白質結構和功能之間的關系、改進蛋白質性能的重要工具。隨機突變試劑盒基于易錯 PCR（error-prone PCR）技術，利用 Taq DNA polymerase 不具有 3′→5′校對功能的特性，在特定的反應緩沖體系中，向擴增的目的基因中引入隨機突變密碼子。帶有隨機突變的擴增產(chǎn)物通過雙酶切，連接到表達載體中構建文庫，然后轉化入表達宿主中，進行蛋白活性篩選。如果經(jīng)一次突變反應不能獲得滿意的結果，可采用連續(xù)易錯 PCR（sequential error-prone PCR）策略，即將一次PCR 擴增得到的有用突變基因作為下一次 PCR 擴增的模板，連續(xù)反復地進行隨機誘變，使每一次獲得的突變累積而產(chǎn)生更有意義的突變。 本試劑盒包含有優(yōu)化的 2 x Mut Random System、MutEnhancer 和 ddH2O 三種組分，使用時只需加入適量的 DNA 板和合成的兩條擴增引物，并用水補足體積，即可進行擴增反應，操作簡便快速，大大減少了多次加樣可能造成的出錯和污染機會。2 x MutRandom System 含有優(yōu)化濃度的 Taq DNA polymerase、dNTPs、反應緩沖液和穩(wěn)定劑，可最大限度地克服常規(guī)易錯 PCR 技術中，由于 Taq DNA polymerase 本身的偏愛性造成的以 GC 突變?yōu)橹鞯娜秉c，獲得相對均衡的突變譜。堿基突變率可通過適量添加 Mut Enhancer、調整模板 DNA 量和改變PCR 擴增循環(huán)數(shù)進行控制。