花生粕是從仁經(jīng)壓榨提煉油料后的產(chǎn)品，而花生粕的營養(yǎng)價值較高， 其代謝能是粕類飼料中zui高的， 粗蛋白質(zhì)含量接近大豆粕，高達達48%以上。
可使用沛歐凱氏定氮儀SKD-100及紅外石英消化爐SKD-08S2來測定其粗蛋白含量，（若蛋白質(zhì)的含氮量已知時，則可用此法測定樣品中蛋白質(zhì)的含量。）
當?shù)鞍踪|(zhì)與濃硫酸共熱時，其中的碳、氫兩元素被氧化成二氧化碳和水，而氮則轉(zhuǎn)變成氨，并進一步與硫酸作用天生硫酸銨。此過程通常稱為“消化”。但是，這個反應進行得比較緩慢，通常需要加進硫酸鉀或硫酸鈉以進步反應液的沸點，并加進硫酸銅作為催化劑，以促進反應的進行。消化完成后，在凱氏定氮儀中加進濃堿，可使消化液中的硫酸銨分解，游離出氨，借助水蒸汽蒸餾法，將產(chǎn)生的氨蒸餾到一定量、一定濃度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后，氨與溶液中氫離子結(jié)合，使溶液中的氫離子濃度降低，指示劑顏色改變，然后用標準無機鹽酸滴定，直至恢復溶液中原來的氫離子濃度為止。根據(jù)所用標準鹽酸的量可計算出待測物中的總氮量。蛋白質(zhì)的含氮量為16%，即1克蛋白質(zhì)中的氮相當于6.25克蛋白質(zhì)，用凱氏定氮法測出的含氮量乘以6.25,即得樣品中蛋白質(zhì)的含量。
1 實驗材料
1.1 器材
SKD-100凱氏定氮儀 、SKD-08S2紅外石英消化爐（消化爐可以任意選擇消化孔數(shù)，而不影響熱量散失）1.2 試劑
實驗材料
器材
300ml凱氏燒瓶 4個；
移液管；錐形瓶；
試管；
小玻璃珠
試劑
98%濃硫酸分析純；
35％氫氧化鈉溶液；
2％硼酸溶液；
標準鹽酸溶液（0.01mol／L）。
粉末硫酸鉀-硫酸銅混合物 ：K2SO4與CuSO4·5H2O以3：1配比研磨混合。
混合指示劑（田氏指示劑）：由50ml 0.1％甲烯藍乙醇溶液與200ml 0.1％甲基紅乙醇溶液混合配成，貯于棕色瓶中備用。
樣品溶液：配制3mg/ml的牛血清白蛋白溶液作為樣品。
2.實驗步驟
安裝凱氏定氮儀。
消化：取4個300ml凱氏燒瓶并標號,各加1顆玻璃珠，在1號及2號瓶中各加樣品1ml，催化劑（K2SO4- CuSO4·5H2O）200 mg，濃硫酸5 ml。留意加樣品時應直接送進瓶底，而不要沾在瓶口和瓶頸上。在3號及4號瓶中各加1 ml蒸餾水和與1、2號瓶相同量的催化劑和濃硫酸，作為對照。在透風櫥內(nèi)進行消化。在消化開始時應控制火力，不要使液體沖到瓶頸。待硫酸開始分解并放出SO2白煙后，適當加強火力，繼續(xù)消化，直至消化液呈透明淡綠色為止。撤掉火力，冷卻至室溫。 （上海沛歐SKD-08S2消化爐可編程設定消化爐消化樣品的升溫曲線）
蒸餾： 蒸餾器的洗滌：用水洗滌干凈微量凱氏定氮儀，在蒸汽發(fā)生器中加進用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑，用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鐘后，在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶，繼續(xù)蒸汽洗滌2分鐘，觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色，如不變色則證實蒸餾裝置內(nèi)部已洗滌干凈。移走錐形瓶，停止加熱，打開夾子。 （沛歐skd-100可以設定清洗程序）
蒸餾：設定取30％的氫氧化鈉溶液10ml，向玻璃杯中加進蒸餾水約5ml稀釋液，設定蒸餾時間5分鐘，開始蒸餾。氨氣進進錐形瓶，瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。再繼續(xù)下一個蒸餾操縱。待樣品和對照均蒸餾完畢后，同時進行滴定。
滴定：用0.01mol／L的標準鹽酸溶液滴定各錐形瓶中收集的氨量，硼酸指示劑溶液由綠色變淡紫色為滴定終點。
結(jié)果計算：
其中：
A為滴定樣品用往的鹽酸溶液均勻ml數(shù)；
B為滴定對照液用往的鹽酸溶液均勻ml數(shù)；
C為所取樣品溶液的ml數(shù)
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