定氮儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質(zhì)含量的儀器。是食品廠、飲用水廠,藥品檢驗,肥料測定中廣泛應用,是檢測種子、乳制品、飲料、飼料、土壤及其他農(nóng)副產(chǎn)品中氮含量的專用儀器。因其蛋白質(zhì)含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法和杜馬斯燃燒定氮法,故分別被稱為凱氏定氮儀和杜馬斯定氮儀。
凱氏定氮法原理:
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸硝化樣品將有機氮都轉(zhuǎn)變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收,再以標準酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。
杜馬斯燃燒法原理:
杜馬斯燃燒的方法是將一定量的樣品封裝在鋁舟中,然后在高溫爐中進行燃燒;在催化劑和氧氣的環(huán)境中,樣品燃燒后生成的氣體為:CO2、H2O、NOx;這些氣體再經(jīng)過還原爐后,NOx被還原為N2,而CO2和H2O分離開;最后氮元素被熱傳導檢測器(TCD)來測量出含量。全部測量過程在3分鐘內(nèi)完成。
凱氏定氮法的普遍適用性、精確性和可重復性已經(jīng)得到了國際的廣泛認可。它已經(jīng)被確定為檢測食品中蛋白質(zhì)含量的標準方法。
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