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          用中性粒細(xì)胞分離液提取中性粒細(xì)胞過程

          時間:2010-10-22閱讀:4174
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          銷售直線:021-31322331、一、實驗所需材料:

          865512910、

          hyf@ebioeasy.com

           

            1、中性粒細(xì)胞分離液(histopaque)

            2、全血

            3、Hanks液

            4、離心管若干

            5、離心機(jī)

            6、移液管,移液搶

            二、實驗步驟

            1. 將所有試劑放至室溫。

            2、用離心管收集全血1-2ml

            3、加等體積的Hanks液至全血中組成

            4、加2ml中性粒細(xì)胞分離液至裝至離心管中。

            5、將全血和Hanks液加入分離液中

            6、4℃,900r/min離心8-10min血液此時應(yīng)該分為6層:血漿、單核細(xì)胞層、分離液、中性粒細(xì)胞、其余的分離液、紅細(xì)胞沉淀層。如果分層不是很明顯,會導(dǎo)致分離的細(xì)胞不純,則需要重復(fù)分離。

            7、用吸管小心地移去上面的三層(血漿、單核細(xì)胞和分離液)

            8、小心地吸取中性粒細(xì)胞層和其下面的分離液層,轉(zhuǎn)移至一個干凈的離心管中。

            9、加Hanks液3ml,后4℃,900r/min離心8-10min,棄上清,留沉淀,重復(fù)2次。

            10、如果細(xì)胞用來提RNA,可加Trizol 1ml保存。


          相關(guān)推薦:透析袋,細(xì)胞分離液,抗體,細(xì)胞因子,fermentas,wako,
           

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