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        1. 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
          中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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          上海研域生物為您總結(jié)人支氣管成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法

          時(shí)間:2024/8/26閱讀:1524
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          上海研域生物人支氣管成纖維細(xì)胞有關(guān)的產(chǎn)品的原料與生產(chǎn)是質(zhì)量的根本,在產(chǎn)品質(zhì)量方面得到了的保證之后實(shí)驗(yàn)效果自然好,您在使用實(shí)驗(yàn)的過程中可以聯(lián)系我司專業(yè)技術(shù)員指導(dǎo)技術(shù)。

          支氣管成即無(wú)紋肌的通稱,平滑肌是由長(zhǎng)紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官,而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素(肌層)。平滑肌細(xì)胞互相連接,形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官;在功能上可以通過縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動(dòng)和變形,也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮,使器官對(duì)抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀。

          人支氣管成纖維細(xì)胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與許多疾病的病理生理過程有關(guān).如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發(fā)病時(shí),可以檢測(cè)到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大,表型也發(fā)生改變,由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型,并分泌多種與細(xì)胞因子;而且出現(xiàn)向氣管腔遷移的跡象。

          人支氣管成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)

          1. 取4-5周齡的小鼠,斷頸處死后,泡于75%的酒精中

          2. 剖開胸腔,取出完整氣管及肺組織,放入無(wú)菌PBS中

          3. 在體視顯微鏡下,小心分離出下游支氣管

          4. 用眼科剪及鑷子分離肌層并剪碎

          5. 加入0.1% I + II + IV + dispase,4℃過夜消化

          6. 第二天置于37℃水浴搖床中消化2~3h

          7. 待液體變渾濁后加入*培養(yǎng)基終止消化,充分吹打

          8. 過100目篩網(wǎng),收集濾液,1000rpm離心5min,棄去上清

          9. 用培養(yǎng)基重懸沉淀,鋪瓶。

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