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兔血清的運用方法:
1、稱取本品23.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,拌和加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
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2、樣品的稀釋及處理,略。
3、依據(jù)商檢的規(guī)范要求或對標本污染狀況的估量,兔血清選擇2—3個稀釋度,分別在10倍遞增稀釋的一起,即以汲取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內,每個稀釋度做兩個平皿。
4、稀釋液移入平皿后,應及時將涼至45℃的瓊脂培養(yǎng)基(可放置于45℃水浴箱保溫)注入平皿約15mL,并滾動平皿使混合均勻。一起將瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內作空白對照。
5、待瓊脂凝固后,翻轉平板,置36±1℃溫箱內培養(yǎng)48±2h。
6、調查成果并進行計數(shù)。25-250個菌落為適宜規(guī)模。
兔血清保存注意事項:
1、需求長期保存的兔血清有必要儲存于-20℃ - 兔血清-70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超越1月,由于血清結冰時體積會添加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱,有必要預留定體積空間,否則易產生污染或玻璃瓶凍裂。
2、瓶裝血清凍結需選用逐步凍結法:-20℃ 至 -70℃ 兔血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫,待悉數(shù)溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(當心勿形成氣泡),使溫度與兔血清成分均一,減少沉積的產生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍結,因溫度改動太大,容易形成蛋白質凝集而呈現(xiàn)沉積。
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