了解離體哺乳類動(dòng)物心臟灌流方法(Langendorff氏法)和離體心臟冠脈流量(coronary flow ,CF)的測定。觀察腎上腺素、乙酰膽堿和垂體后葉素對心臟活動(dòng)及冠脈流量的影響。
【原理】
心臟從動(dòng)物體上摘取之后,用有一定壓力、溫度(38℃)并充氧的克氏液經(jīng)主動(dòng)脈根部灌流。灌流液經(jīng)冠狀動(dòng)脈口進(jìn)入冠狀血管營養(yǎng)心臟,以維持心臟的節(jié)律性活動(dòng)。灌流液經(jīng)冠狀血管流入右心房,然后由腔靜脈口及肺動(dòng)脈口流出,在單位時(shí)間內(nèi)的流出量即為冠狀動(dòng)脈流量(冠脈流量)。心臟活動(dòng)可通過壓力換能器(心室內(nèi)放置水囊)進(jìn)行記錄,也可用張力換能器進(jìn)行記錄。
【材料】
家兔或大鼠;0.1g/L腎上腺素,0.1g/L乙酰膽堿,10U/ml垂體后葉素,克氏液(Krebs液),95%O2+5%CO2混合氣體;灌流液貯瓶(Marriotto),心臟Langendorff法灌流裝置,超級恒溫槽,壓力換能器或張力換能器,微機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)。
【方法】
1.實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接和儀器參數(shù)設(shè)置
Langendorff灌流裝置(圖8-31-1)包括供氣、恒壓灌流和恒溫三個(gè)部分。
(1)將灌流系統(tǒng)用膠管連接,灌流液貯瓶灌滿灌流液。調(diào)整灌流液貯瓶(Marriotto)的高度使灌流壓力達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求,一般要求Marriotto瓶中心管的下端距心臟的高度為70~90cm。
(2)混合氣瓶(也可用球膽)的減壓閥出口用軟管接至灌流管內(nèi)的充氣管,調(diào)節(jié)氣瓶上的減壓閥,使灌流液中的氣泡連續(xù)且小而均勻。
(3)調(diào)節(jié)超級恒溫器使心臟插管內(nèi)的灌流液溫度恒定在38℃左右。為了保證離體心臟的表面有一定的溫度和濕度,將心臟置于由玻璃或有機(jī)玻璃制成的保溫灌流槽內(nèi)。保溫灌流槽內(nèi)容積約為100ml左右,槽的底部有漏斗形的開口,上方蓋子蓋住可以保持槽內(nèi)溫度恒定。
(4)微機(jī)生物信號處理系統(tǒng)參數(shù)設(shè)置
壓力換能器連接微機(jī)生物信號處理系統(tǒng)第1通道,心電引導(dǎo)電極連接第3通道。