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地高辛試劑盒/Roche地高辛標記試劑盒
點擊次數(shù):10316 發(fā)布時間:2009-10-20
地高辛試劑盒/Roche地高辛標記試劑盒 的選擇
DIG標記及檢測試劑盒 | |||
DIG(地高辛)DNA標記及檢測試劑盒 | |||
DIG DNA labeling and Detection Kit | |||
原理:用DIG-dUTP為底物,隨機摻入法進行DNA標記,通過酶聯(lián)免疫雜交的方法檢測。該試劑盒可以標記25次反應,每次標記的DNA量為10ug-20ug,并可做50張10×10cm膜的雜交和檢測。 應用:非放射性DNA標記及檢測試劑盒以檢測0.1pg的同源DNA,能檢測1ug哺乳動物DNA中的單拷貝基因。跟放射性標記系統(tǒng)比較,此試劑盒能快速得到實驗結(jié)果,而且消除了放射性同位素的不安全問題。從DNA標記和雜交能見到檢測結(jié)果,整個實驗過程24小時內(nèi)能完成。這試劑盒的靈敏度與特異性使它適用于所有的雜交技術(shù)以替代放射性同位素標記和放射自顯影術(shù)。這個標記方法和檢測系統(tǒng)適用于DNA—印跡轉(zhuǎn)移、菌落雜交、噬斑雜交及原位雜交。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1093657 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG DNA 標記試劑盒 | |||
DIG DNA Labeling Kit | |||
用DIG-11-dUTP對DNA作隨機引物擴增法標記。帶DIG標記的探針可用于各種類型膜雜交,標記的探針通過酶聯(lián)免疫法檢測。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1175033 | Kit(40個標記反應) | Roche | 查詢 |
DIG 標記試劑 | |||
DIG High Prime | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1585606 | 160μ1(40個標記反應) | Roche | 查詢 |
附:(原位雜交技術(shù)能夠在細胞或組織內(nèi)的實際位置顯現(xiàn)基因及其表達產(chǎn)物,所以此技術(shù)已成為一種十分重要的研究工具。DIG系統(tǒng)能廣泛應用于原位雜交技術(shù),取代同位素方法。 | |||
DIGDNA標記及檢測Starter Kit 1 | |||
DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit 1 | |||
Roche公司現(xiàn)為用戶提供一種新的DIG標記及檢測試盒DIG High Prime DNA Labeling and Detection Kit I。與原有的DIG DNA Labeling and Detection kit(Cat.093657)比較,本產(chǎn)品有以下特點:
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產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1745832 | Kit | Roche | 查詢 |
DIGDNA標記及檢測Starter Kit∏ | |||
DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit∏ | |||
對于需要使用化學發(fā)光法檢測的用戶,我公司現(xiàn)提供了此新的DIG標記及檢測試劑盒。 與上述的StarterKit I不同,此新的StarterKit ∏所含的底物為CSPD,但它同樣有以下特點:
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產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1585614 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG發(fā)光檢測試劑盒(可做50張10×10cm膜檢測反應) | |||
DIG Luminescent Detection Kit(for nucleic acids) | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1363514 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG核酸檢測試劑盒 | |||
DIG Nucleic Acid Detection Kit | |||
用DIG標記的核酸作探針,按常規(guī)方法進行雜交??勺?0張膜檢測反應。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1175041 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG系統(tǒng)是您理想的核酸標記及檢測工具 | |||
經(jīng)過近十年的開發(fā)和*化,DIG系統(tǒng)現(xiàn)已成為產(chǎn)品zui齊備,在國內(nèi)外zui被接受和zui常被文獻引述的非放射性系統(tǒng),其優(yōu)點包括: | |||
DIG寡核苷酸5′末端標記試劑盒 | |||
DIG Oligonucleotide 5′-End Labeling Set | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1480863 | Set (10個標記反應) | Roche | 查詢 |
PCR DIG 探針合成試劑盒 | |||
PCR DIG Probe Synthesis Kit | |||
標記的探針可在Southem雜交后從5-10ug的人基因級別DNA檢測出單拷貝基因,是從少量DNA模板制備大量探針的zui有效、的方法。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1636090 | Kit(25個標記反應) | Roche | 查詢 |
DIG RNA標記試劑盒 | |||
DIG RNA Labeling Kit(SP6/T7) | |||
RNA是由SP6或T7RNA聚合酶催化的體外轉(zhuǎn)錄反應里被標記的。在轉(zhuǎn)錄反應過程中,核苷酸類似物Digoxigenin-11-UTP(DIG-UTP)是被利用來替代UTP(或其它放射性標記了的核苷酸)的角色。在新合成的RNA中,約每25個堿基便摻入了DIG-UTP。可標記轉(zhuǎn)錄反應2×10標記反應后,DIG-標記RNA可用于各種雜交技術(shù),包括: | |||
●Northern印跡 ●Southern印跡 ●Dot/Slot印跡 | |||
●菌落篩選 ●噬菌斑雜交 ●原位雜交 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1175025 | Kit | Roche | 查詢 |
附 DIG 系統(tǒng)在膜雜交中的應用:點雜交、常規(guī)Southern雜交、使用RNA探針Northern雜交。如需相關(guān)資料說明書,查詢! | |||
DIG標記反應試劑 | |||
抗地高辛(DIG)堿性磷酸酶復合物Anti-DIG-AP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1093274 | 150u(200ul) | Roche | 查詢 |
CSPD化學發(fā)光底物 | |||
CSPD Chemiluminescence Substrate | |||
●背景低,15分鐘曝光即可獲得清晰的結(jié)果。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1655884 | 1ml | Roche | 查詢 |
CDP-StarTM化學發(fā)光底物CDP-StarTM Chemiluminescence Substrate ●是目前zui快速、zui靈敏的化學發(fā)光底物,曝光時間只需15-60秒。 ●是以下操作的理想底物: ●檢測哺乳動物的單拷貝基因。 ●在Northern雜交以RNA探針檢測稀有的mRNA。 ●檢測極少量的靶DNA,如制作指紋圖譜及法醫(yī)分析。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1685627 | 1ml | Roche | 查詢 |
DIG對照試紙條 DIG Control Teststrips ●DIG對照和定量試紙條(Cat.669958)能方便估計DIG標記探針的濃度,以取得理想的信嗓比。 ●省時:能在30分鐘內(nèi)測定DIG標記DNA或RNA的濃度。 ●令您在估計探針產(chǎn)量時,可節(jié)省大量試劑。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1669966 | 25條 | Roche | 查詢 |
DIG DNA標記混合物 | |||
DIG DNA Labeling Mix | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1277065 | 50ul(25個反應) | Roche | 查詢 |
DIG 簡便雜交液 DIG Easy-Hyb ●預混、無毒(不含甲酰胺)、即開即用的雜交液。 ●省時:能大量減少雜交時間,令您可在一天內(nèi)完成常規(guī)的Southern Blot或文庫篩選。 ●使用方便:只要將DIG標記探針加進DIG Easy-Hyb.無需再進行任何*化處理。 ●適用范圍廣:適用于DIG系統(tǒng)的各種膜雜交,可采用多種不同的溫度及任何類型的探針(但在原位雜交的效果有待驗證)。 ●雜交效果好,背景低,更適宜做多次雜交。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1603558 | 500ml | Roche | 查詢 |
DIG 清洗及阻斷緩沖液組合 DIG Wash and Block Buffer Set ●是適用清洗、阻斷及檢測的濃縮液。 ●使用前稀釋即可,即使阻斷試劑亦是預制的。 ●經(jīng)過消毒及檢測,確保不含DNase,RNase及污染物 ●包含以馬來酸為基礎的緩沖液,以降低Northern Blot的背景,亦能改善其它應作用中的檢測結(jié)果。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1585762 | 1set(30 blots) | Roche | 查詢 |
阻斷試劑 | |||
Blocking Reagent | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1096176 | 50g | Roche | 查詢 |
DIG標記的UTP | |||
DIG-11-UTP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1209256 | 250nmol(25μl) | Roche | 查詢 |
DIG標記的dUTP | |||
DIG-11-dUTP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1093088 | 25nmol(25μl) | Roche | 查詢 |
DIG標記的ddUTP | |||
DIG-11-ddUTP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1363905 | 25nmol(25μl) | Roche | 查詢 |
尼龍雜交轉(zhuǎn)印膜,帶正電荷 Nylon Membranes, Positively Charged 因其帶正電荷,能緊密結(jié)合DNA而使背景降至zui低,且能迅速轉(zhuǎn)移和結(jié)合DNA,較高機械強度的膜能進行多次探針剝離及重雜交。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1209299 | 20張(10×15cm) | Roche | 查詢` |
1417240 | 1卷(30cm×3m) | Roche | 查詢 |
1699075 | 50張(82mm直徑圓片) | Roche | 查詢 |
1699083 | 50張(132mm直徑圓片) | Roche | 查詢 |
配合原位雜交技術(shù)發(fā)展的先進DIG產(chǎn)品 | |||
原位雜交技術(shù)的發(fā)展迅速,亦不斷推出新的產(chǎn)品配合新的研究方向,除了各種不同的抗體復合物外,還提供以下產(chǎn)品: | |||
DNA探針,人染色體特異 | |||
羅氏(原寶靈曼)現(xiàn)供應多種不同的人染色體特異DIG標記探針,方便您進行熒光原位雜交(FISH)。羅氏公司的探針為包含人衛(wèi)星DNA的質(zhì)粒,在嚴格的條件下,每個探針只在原位與目的染色體的著絲粒雜交。除了供應DIG探針,方便以抗DIG-熒光色素作較靈敏的間接檢測外,還提供熒光素標記的探針作直接檢測。這些探針可用于: | |||
●鑒別在中期散開物或新間期核階段的個別染色體 | |||
●鑒別非整倍體細胞,雜交細胞腫瘤 | |||
●染色體作圖研究 | |||
PRINS反應組合: | |||
PRINS(Primed in Site Labeling)可替代傳統(tǒng)的原位雜交方法,只須幾個步驟便能快速鑒別人染色體。羅氏公司的PRINS反應組合,結(jié)合PRINS與DIG技術(shù),令您能準確地在原位對特異人染色體定位。人染色體首先被變性,與無標記的序列特異寡核苷酸退火,利用此退火的寡核苷酸作引物,可進行DIG-dUTP的標記反應,之后便可對DIG標記作檢測。PRINS反應組合的特點包括: | |||
●靈活:提供個別的特異引物配合您的需要,而且可方便dTTP的濃度,提高靈敏度,更可與標準的原位雜交技術(shù)結(jié)合,取得更多資料 | |||
●使用方便 | |||
●可靠:經(jīng)過應用于人染色體的測試,確保能取得可靠的結(jié)果 | |||
操作DIG的系統(tǒng)的技術(shù)提示 | |||
DIG系統(tǒng)具有安全、方便、快捷、靈活、靈敏度高等優(yōu)點,而且DIG系統(tǒng)所涉及的操作步驟基本上與同位素方法法同,用戶要取得理想的實驗結(jié)果并不困難,但有一些事項必須特別注意,以下列出了一些技術(shù)提示 [Ⅰ]模板的制備 | |||
-須作CsC1-酚-氯仿-乙醇抽提(或zui低限度作酚-氯仿-乙醇抽提)純化模板。 | |||
-插入子沒有載體序列,以避免交叉雜交。 | |||
-玻璃奶方法純化得到的核酸,須在經(jīng)過酚-氯仿-乙醇的抽提后,才可用于標記(High prime)。 | |||
[Ⅱ]標記 | |||
-在使用隨機引物標記法時,須留意變性步驟要在水浴中進行,并須立刻冷卻。 | |||
-在每次標記后都必須檢測標記效率(可用產(chǎn)品DIG定量試紙條Cat.669958和對照試紙條1669966)。 | |||
-如在標記前模板未經(jīng)前述步驟純化,在雜交前建議對探針進行純化??衫玫鞍酌窴作處理,并在變性及加入預先加溫的DIG簡便雜交液(不可用含封阻試劑的緩沖液)之后以0.45um醋酸纖維素濾膜過濾。 | |||
[Ⅲ]印跡 | |||
-應盡量采用羅氏的帶正電雜交膜,以降低背景和得到*的信噪比。 | |||
-處理雜交膜時必須特別小心,并須使用無粉末手套。 | |||
-應根據(jù)不同的核酸種類,采用合適的轉(zhuǎn)移條件。 | |||
[Ⅳ]雜交 | |||
-須根據(jù)GC含量及同源性計算應采用的雜交溫度。 | |||
-在預雜交及zui后清洗之間的所有時間,雜交膜均應保持濕潤。 | |||
-可使用雜交袋或烘箱,但不可使用無蓋的盤。 | |||
-在封閉雜交袋前,必須將雜交液中的氣泡清除。 | |||
-切勿使用過量的探針,以避免過高的背景。一般DNA探針濃度為25ng/ml,RNA探針則為100ng/ml,如使用CDP-Star作底物,探針濃度應減低一半或以上。 | |||
-應盡量采用DIG簡便雜交液。 | |||
-如作Northern印跡: | |||
●須使用十分嚴格的條件。 | |||
●特別建議采用DIG簡便雜交液。 | |||
●應盡量使用RNA探針,因為用DNA探針產(chǎn)生的訊號弱50-100倍。 | |||
[Ⅴ]檢測 | |||
-在使用Anti-DIG-AP前,應在微離心機以10000rpm離心5分鐘,然后在表面抽取該抗體使用。 | |||
-如要保存經(jīng)稀釋的化學發(fā)光底物,應將它消毒過濾,并中入0.1M*。 | |||
-在加入化學發(fā)光底物前應避免有過量的Buffer3留在膜上,可使用已消毒的Whatman紙,在120。C烘2小時輕輕將膜稍為弄干或直接讓Buffer3滴出。 |
DIG標記及檢測試劑盒 | |||
DIG(地高辛)DNA標記及檢測試劑盒 | |||
DIG DNA labeling and Detection Kit | |||
原理:用DIG-dUTP為底物,隨機摻入法進行DNA標記,通過酶聯(lián)免疫雜交的方法檢測。該試劑盒可以標記25次反應,每次標記的DNA量為10ug-20ug,并可做50張10×10cm膜的雜交和檢測。 應用:非放射性DNA標記及檢測試劑盒以檢測0.1pg的同源DNA,能檢測1ug哺乳動物DNA中的單拷貝基因。跟放射性標記系統(tǒng)比較,此試劑盒能快速得到實驗結(jié)果,而且消除了放射性同位素的不安全問題。從DNA標記和雜交能見到檢測結(jié)果,整個實驗過程24小時內(nèi)能完成。這試劑盒的靈敏度與特異性使它適用于所有的雜交技術(shù)以替代放射性同位素標記和放射自顯影術(shù)。這個標記方法和檢測系統(tǒng)適用于DNA—印跡轉(zhuǎn)移、菌落雜交、噬斑雜交及原位雜交。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1093657 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG DNA 標記試劑盒 | |||
DIG DNA Labeling Kit | |||
用DIG-11-dUTP對DNA作隨機引物擴增法標記。帶DIG標記的探針可用于各種類型膜雜交,標記的探針通過酶聯(lián)免疫法檢測。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1175033 | Kit(40個標記反應) | Roche | 查詢 |
DIG 標記試劑 | |||
DIG High Prime | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1585606 | 160μ1(40個標記反應) | Roche | 查詢 |
附:(原位雜交技術(shù)能夠在細胞或組織內(nèi)的實際位置顯現(xiàn)基因及其表達產(chǎn)物,所以此技術(shù)已成為一種十分重要的研究工具。DIG系統(tǒng)能廣泛應用于原位雜交技術(shù),取代同位素方法。 | |||
DIGDNA標記及檢測Starter Kit 1 | |||
DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit 1 | |||
Roche公司現(xiàn)為用戶提供一種新的DIG標記及檢測試盒DIG High Prime DNA Labeling and Detection Kit I。與原有的DIG DNA Labeling and Detection kit(Cat.093657)比較,本產(chǎn)品有以下特點:
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產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1745832 | Kit | Roche | 查詢 |
DIGDNA標記及檢測Starter Kit∏ | |||
DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit∏ | |||
對于需要使用化學發(fā)光法檢測的用戶,我公司現(xiàn)提供了此新的DIG標記及檢測試劑盒。 與上述的StarterKit I不同,此新的StarterKit ∏所含的底物為CSPD,但它同樣有以下特點:
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產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1585614 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG發(fā)光檢測試劑盒(可做50張10×10cm膜檢測反應) | |||
DIG Luminescent Detection Kit(for nucleic acids) | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1363514 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG核酸檢測試劑盒 | |||
DIG Nucleic Acid Detection Kit | |||
用DIG標記的核酸作探針,按常規(guī)方法進行雜交??勺?0張膜檢測反應。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1175041 | Kit | Roche | 查詢 |
DIG系統(tǒng)是您理想的核酸標記及檢測工具 | |||
經(jīng)過近十年的開發(fā)和*化,DIG系統(tǒng)現(xiàn)已成為產(chǎn)品zui齊備,在國內(nèi)外zui被接受和zui常被文獻引述的非放射性系統(tǒng),其優(yōu)點包括: | |||
DIG寡核苷酸5′末端標記試劑盒 | |||
DIG Oligonucleotide 5′-End Labeling Set | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1480863 | Set (10個標記反應) | Roche | 查詢 |
PCR DIG 探針合成試劑盒 | |||
PCR DIG Probe Synthesis Kit | |||
標記的探針可在Southem雜交后從5-10ug的人基因級別DNA檢測出單拷貝基因,是從少量DNA模板制備大量探針的zui有效、的方法。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1636090 | Kit(25個標記反應) | Roche | 查詢 |
DIG RNA標記試劑盒 | |||
DIG RNA Labeling Kit(SP6/T7) | |||
RNA是由SP6或T7RNA聚合酶催化的體外轉(zhuǎn)錄反應里被標記的。在轉(zhuǎn)錄反應過程中,核苷酸類似物Digoxigenin-11-UTP(DIG-UTP)是被利用來替代UTP(或其它放射性標記了的核苷酸)的角色。在新合成的RNA中,約每25個堿基便摻入了DIG-UTP??蓸擞涋D(zhuǎn)錄反應2×10標記反應后,DIG-標記RNA可用于各種雜交技術(shù),包括: | |||
●Northern印跡 ●Southern印跡 ●Dot/Slot印跡 | |||
●菌落篩選 ●噬菌斑雜交 ●原位雜交 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1175025 | Kit | Roche | 查詢 |
附 DIG 系統(tǒng)在膜雜交中的應用:點雜交、常規(guī)Southern雜交、使用RNA探針Northern雜交。如需相關(guān)資料說明書,查詢! | |||
DIG標記反應試劑 | |||
抗地高辛(DIG)堿性磷酸酶復合物Anti-DIG-AP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1093274 | 150u(200ul) | Roche | 查詢 |
CSPD化學發(fā)光底物 | |||
CSPD Chemiluminescence Substrate | |||
●背景低,15分鐘曝光即可獲得清晰的結(jié)果。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1655884 | 1ml | Roche | 查詢 |
CDP-StarTM化學發(fā)光底物CDP-StarTM Chemiluminescence Substrate ●是目前zui快速、zui靈敏的化學發(fā)光底物,曝光時間只需15-60秒。 ●是以下操作的理想底物: ●檢測哺乳動物的單拷貝基因。 ●在Northern雜交以RNA探針檢測稀有的mRNA。 ●檢測極少量的靶DNA,如制作指紋圖譜及法醫(yī)分析。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1685627 | 1ml | Roche | 查詢 |
DIG對照試紙條 DIG Control Teststrips ●DIG對照和定量試紙條(Cat.669958)能方便估計DIG標記探針的濃度,以取得理想的信嗓比。 ●省時:能在30分鐘內(nèi)測定DIG標記DNA或RNA的濃度。 ●令您在估計探針產(chǎn)量時,可節(jié)省大量試劑。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1669966 | 25條 | Roche | 查詢 |
DIG DNA標記混合物 | |||
DIG DNA Labeling Mix | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1277065 | 50ul(25個反應) | Roche | 查詢 |
DIG 簡便雜交液 DIG Easy-Hyb ●預混、無毒(不含甲酰胺)、即開即用的雜交液。 ●省時:能大量減少雜交時間,令您可在一天內(nèi)完成常規(guī)的Southern Blot或文庫篩選。 ●使用方便:只要將DIG標記探針加進DIG Easy-Hyb.無需再進行任何*化處理。 ●適用范圍廣:適用于DIG系統(tǒng)的各種膜雜交,可采用多種不同的溫度及任何類型的探針(但在原位雜交的效果有待驗證)。 ●雜交效果好,背景低,更適宜做多次雜交。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1603558 | 500ml | Roche | 查詢 |
DIG 清洗及阻斷緩沖液組合 DIG Wash and Block Buffer Set ●是適用清洗、阻斷及檢測的濃縮液。 ●使用前稀釋即可,即使阻斷試劑亦是預制的。 ●經(jīng)過消毒及檢測,確保不含DNase,RNase及污染物 ●包含以馬來酸為基礎的緩沖液,以降低Northern Blot的背景,亦能改善其它應作用中的檢測結(jié)果。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1585762 | 1set(30 blots) | Roche | 查詢 |
阻斷試劑 | |||
Blocking Reagent | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1096176 | 50g | Roche | 查詢 |
DIG標記的UTP | |||
DIG-11-UTP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1209256 | 250nmol(25μl) | Roche | 查詢 |
DIG標記的dUTP | |||
DIG-11-dUTP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1093088 | 25nmol(25μl) | Roche | 查詢 |
DIG標記的ddUTP | |||
DIG-11-ddUTP | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1363905 | 25nmol(25μl) | Roche | 查詢 |
尼龍雜交轉(zhuǎn)印膜,帶正電荷 Nylon Membranes, Positively Charged 因其帶正電荷,能緊密結(jié)合DNA而使背景降至zui低,且能迅速轉(zhuǎn)移和結(jié)合DNA,較高機械強度的膜能進行多次探針剝離及重雜交。 | |||
產(chǎn)品號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 廠商 | 價格$ |
1209299 | 20張(10×15cm) | Roche | 查詢` |
1417240 | 1卷(30cm×3m) | Roche | 查詢 |
1699075 | 50張(82mm直徑圓片) | Roche | 查詢 |
1699083 | 50張(132mm直徑圓片) | Roche | 查詢 |
配合原位雜交技術(shù)發(fā)展的先進DIG產(chǎn)品 | |||
原位雜交技術(shù)的發(fā)展迅速,亦不斷推出新的產(chǎn)品配合新的研究方向,除了各種不同的抗體復合物外,還提供以下產(chǎn)品: | |||
DNA探針,人染色體特異 | |||
羅氏(原寶靈曼)現(xiàn)供應多種不同的人染色體特異DIG標記探針,方便您進行熒光原位雜交(FISH)。羅氏公司的探針為包含人衛(wèi)星DNA的質(zhì)粒,在嚴格的條件下,每個探針只在原位與目的染色體的著絲粒雜交。除了供應DIG探針,方便以抗DIG-熒光色素作較靈敏的間接檢測外,還提供熒光素標記的探針作直接檢測。這些探針可用于: | |||
●鑒別在中期散開物或新間期核階段的個別染色體 | |||
●鑒別非整倍體細胞,雜交細胞腫瘤 | |||
●染色體作圖研究 | |||
PRINS反應組合: | |||
PRINS(Primed in Site Labeling)可替代傳統(tǒng)的原位雜交方法,只須幾個步驟便能快速鑒別人染色體。羅氏公司的PRINS反應組合,結(jié)合PRINS與DIG技術(shù),令您能準確地在原位對特異人染色體定位。人染色體首先被變性,與無標記的序列特異寡核苷酸退火,利用此退火的寡核苷酸作引物,可進行DIG-dUTP的標記反應,之后便可對DIG標記作檢測。PRINS反應組合的特點包括: | |||
●靈活:提供個別的特異引物配合您的需要,而且可方便dTTP的濃度,提高靈敏度,更可與標準的原位雜交技術(shù)結(jié)合,取得更多資料 | |||
●使用方便 | |||
●可靠:經(jīng)過應用于人染色體的測試,確保能取得可靠的結(jié)果 | |||
操作DIG的系統(tǒng)的技術(shù)提示 | |||
DIG系統(tǒng)具有安全、方便、快捷、靈活、靈敏度高等優(yōu)點,而且DIG系統(tǒng)所涉及的操作步驟基本上與同位素方法法同,用戶要取得理想的實驗結(jié)果并不困難,但有一些事項必須特別注意,以下列出了一些技術(shù)提示 [Ⅰ]模板的制備 | |||
-須作CsC1-酚-氯仿-乙醇抽提(或zui低限度作酚-氯仿-乙醇抽提)純化模板。 | |||
-插入子沒有載體序列,以避免交叉雜交。 | |||
-玻璃奶方法純化得到的核酸,須在經(jīng)過酚-氯仿-乙醇的抽提后,才可用于標記(High prime)。 | |||
[Ⅱ]標記 | |||
-在使用隨機引物標記法時,須留意變性步驟要在水浴中進行,并須立刻冷卻。 | |||
-在每次標記后都必須檢測標記效率(可用產(chǎn)品DIG定量試紙條Cat.669958和對照試紙條1669966)。 | |||
-如在標記前模板未經(jīng)前述步驟純化,在雜交前建議對探針進行純化。可利用蛋白酶K作處理,并在變性及加入預先加溫的DIG簡便雜交液(不可用含封阻試劑的緩沖液)之后以0.45um醋酸纖維素濾膜過濾。 | |||
[Ⅲ]印跡 | |||
-應盡量采用羅氏的帶正電雜交膜,以降低背景和得到*的信噪比。 | |||
-處理雜交膜時必須特別小心,并須使用無粉末手套。 | |||
-應根據(jù)不同的核酸種類,采用合適的轉(zhuǎn)移條件。 | |||
[Ⅳ]雜交 | |||
-須根據(jù)GC含量及同源性計算應采用的雜交溫度。 | |||
-在預雜交及zui后清洗之間的所有時間,雜交膜均應保持濕潤。 | |||
-可使用雜交袋或烘箱,但不可使用無蓋的盤。 | |||
-在封閉雜交袋前,必須將雜交液中的氣泡清除。 | |||
-切勿使用過量的探針,以避免過高的背景。一般DNA探針濃度為25ng/ml,RNA探針則為100ng/ml,如使用CDP-Star作底物,探針濃度應減低一半或以上。 | |||
-應盡量采用DIG簡便雜交液。 | |||
-如作Northern印跡: | |||
●須使用十分嚴格的條件。 | |||
●特別建議采用DIG簡便雜交液。 | |||
●應盡量使用RNA探針,因為用DNA探針產(chǎn)生的訊號弱50-100倍。 | |||
[Ⅴ]檢測 | |||
-在使用Anti-DIG-AP前,應在微離心機以10000rpm離心5分鐘,然后在表面抽取該抗體使用。 | |||
-如要保存經(jīng)稀釋的化學發(fā)光底物,應將它消毒過濾,并中入0.1M*。 | |||
-在加入化學發(fā)光底物前應避免有過量的Buffer3留在膜上,可使用已消毒的Whatman紙,在120。C烘2小時輕輕將膜稍為弄干或直接讓Buffer3滴出。 |