目錄:北京博蕾德生物科技有限公司>>其他>>細胞培養(yǎng)>> 破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50片 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 250 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
| 主要用途 | 破骨細胞培養(yǎng) |
破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice產品描述：
開始骨吸收實驗前用培養(yǎng)基重懸骨切片，成熟或早熟的破骨細胞，無論是由外周血單核細胞（PBMC）或共培養(yǎng)產生的，都可以將細胞分散覆蓋于骨切片上。根據破骨細胞的成熟形態(tài)和影響因素，凹點會在3-14天出現(xiàn)。破骨細胞數量可通過Tracp 活性實驗來觀察，吸收凹點和溝可通過甲苯藍染色觀察（如圖2.）。
來源：骨切片由牛股骨的皮質部分制成，*適合96孔板，直徑6mm。
厚度：1）0.2mm（適用于免疫熒光，共聚焦實驗）。
2）0.4mm（適用于下游分析）
儲存：置于4°C下96%乙醇中。
應用：用于骨吸收實驗檢測，通過破骨細胞的骨吸收形成的吸收坑，可以用來監(jiān)測培養(yǎng)的破骨細胞的骨吸收情況，*適合96孔板。
骨吸收實驗簡介：
該方法提供一種易于檢測的定量方案，用于體外測定破骨細胞介導的骨吸收。破骨細胞接種于骨切片上，吸收坑的形成可以通過甲苯胺藍染色進行定量。
實驗材料和試劑：
1） 破骨細胞
2） 骨切片
3） 異丙醇
4） 甲苯胺藍（Sigma cat#198161）
5） 超純水
6） 96孔細胞培養(yǎng)板（Greiner , Cat#650185）
實驗設備：
1. 骨形態(tài)測量系統(tǒng)
2. 超聲波清洗器
操作流程：
1. 破骨細胞接種于（250000 細胞/孔）含和不含顱骨成骨細胞的96孔細胞培養(yǎng)板上（提前孔內放置骨切片）。
2. 細胞在合適的培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)至少14天。
3. 此后，用PBS洗滌細胞兩次，在250ul 70%異丙醇中，用超聲波高功率處理至少15分鐘，使細胞從骨切片脫落。
注意：250ul 70%異丙醇處理使細胞更容易從骨切片脫落。
4. 加入100ul 甲苯胺藍溶液（1%溶解于水），室溫染色2分鐘。
5. 用250ul 超純水沖洗骨切片至少5次，以洗掉切片上的殘留物。
6. 吸收坑被染成深藍色（圖1），吸收坑面積可以通過骨測量系統(tǒng)進行量化或者吸收坑可通過光學顯微鏡觀察計數。
破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice訂購：
| 品牌 | 英文名稱 | 中文名稱 | 規(guī)格 | 貨期 |
| Bone slice | Bone Slices | 骨切片 | 50片 | 大量現(xiàn)貨 |
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