92-01-348 NK細(xì)胞分選試劑盒
- 公司名稱 蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 92-01-348
- 產(chǎn)地 蘇州
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2024/11/12 10:38:28
- 訪問次數(shù) 725
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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、檢測中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。代理的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，PCR儀，移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，移液器，超低溫冰箱，醫(yī)用冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)等多家等。在提供產(chǎn)品的同時(shí)也為您提供生物實(shí)驗(yàn)室常用的耗材試劑，以及實(shí)驗(yàn)室整體搬遷、第三方檢測、計(jì)量與校準(zhǔn)，二手儀器調(diào)劑等服務(wù)。完整的實(shí)驗(yàn)室一站式體驗(yàn)使您的選擇更加方便、快捷、靈活。
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| 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) |
|---|
NK細(xì)胞分選試劑盒可用于從小鼠脾臟單細(xì)胞懸液中分離未經(jīng)標(biāo)記的NK 細(xì)胞。非NK細(xì)胞(T細(xì)胞、DC 細(xì)胞、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、紅系細(xì)胞)被生物素化的抗體和識別生物素的磁珠標(biāo)記通過去除這些非NK細(xì)胞，從而得到高純度的NK細(xì)胞。
其分選原理為：用生物素結(jié)合的單克隆抗體混合物(作為一級標(biāo)記試劑)和與磁珠結(jié)合的抗生物素單克隆抗體(作為二級標(biāo)記試劑)對非靶細(xì)胞進(jìn)行間接磁性標(biāo)記。磁性標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞在分選器的磁場中被保留在分選柱中，而未標(biāo)記的NK 細(xì)胞則通過分選柱流出。
試劑和儀器要求
緩沖液（pH7.2 PBS，0.5% BSA、2mM EDTA， 2~8℃）
分選柱和分選器。
(可選)熒光偶聯(lián)的抗體用于流式分析。
(可選)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死細(xì)胞。
(可選)死細(xì)胞清除試劑盒用于死細(xì)胞的清除。
(可選)預(yù)分離過濾器去除細(xì)胞團(tuán)塊。
操作步驟
一、樣本準(zhǔn)備
使用手動方法或組織解離器制備脾臟單細(xì)胞懸液。
二、磁珠標(biāo)記
1.細(xì)胞計(jì)數(shù)。
2.300xg離心10分鐘。去除上清。
3.每107個(gè)細(xì)胞總量使用 40μL緩沖液重懸。
4.每107個(gè)細(xì)胞總量添加 10μLNK細(xì)胞生物素抗體混合物。
5.混勻，2-8℃孵育 5分鐘。
6.每107個(gè)細(xì)胞加入 2mL緩沖液洗滌細(xì)胞，300xg離心10分鐘，去上清。
7.每107個(gè)細(xì)胞添加 80μL 緩沖液。
8.每107個(gè)細(xì)胞添加 20μL抗生物素磁珠。
9.混勻，2-8℃孵育 10分鐘。
10.(可選)添加染色抗體。
11.進(jìn)行細(xì)胞分選步驟。
三、細(xì)胞分選
xM或xL分選柱進(jìn)行細(xì)胞分選
1.將分選柱置于相對應(yīng)的分選器中。
2.用適當(dāng)體積的緩沖液潤洗分選柱（xM: 500 μL； xL: 3mL）
3.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至分選柱中。收集含有未標(biāo)記細(xì)胞的流出液，即 NK細(xì)胞。
4.加適量的緩沖液，收集總流出物，并與步驟 3中的流出液混合，這是NK細(xì)胞。（ xM: 500 μL；xL: 3mL）
5.(可選 )將分選柱從分選器中取出，并將其放在合適的收集管上。加適量的緩沖液到分選柱中，迅速用塞子推下，得到就是磁性標(biāo)記的非NK細(xì)胞。（ xM: 1mL；xL: 5mL）
儲存溫度
2-8℃避光保存，請勿冷凍。有效期見試劑外標(biāo)簽。
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