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          AC11L271/AC11L272 EdU(動物注射)

          參考價 680
          訂貨量 ≥1
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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            公司前身為上海李記生物科技有限公司,成立于2015年。和元李記在2023年由和元生物和李記生物合資成立,是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的國產(chǎn)生物試劑公司,專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,致力于為客戶提供技術(shù)優(yōu)秀 、方便易用、經(jīng)濟(jì)高效的產(chǎn)品,產(chǎn)品范圍包括:細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)和生物化學(xué)相關(guān)的實驗試劑及試劑盒。

            目前在全國40余座城市均有授權(quán)代理;直接服務(wù)終端超千家,涵蓋CRO、藥企、高校、醫(yī)院和科研院所;李記產(chǎn)品已幫助客戶發(fā)表數(shù)百篇SCI,多篇CNS。

            優(yōu)勢產(chǎn)品:蛋白Marker、EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑、CCK-8、支原體快速檢測試劑盒、核酸染料(GelRed/GelGreen)、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒、熒光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清、細(xì)胞凋亡檢測試劑盒等。

          胎牛血清,轉(zhuǎn)染試劑(高效),凍存液(普通),cck-8,1640培養(yǎng)基,PBS液體,凋亡試劑盒,熒光素鉀鹽,蛋白Mark,發(fā)光液(超敏),快速封閉

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

           

          EdU(動物注射)

          產(chǎn)品描述
          細(xì)胞增殖是評價細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光基團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,此技術(shù)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。
          傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,大小卻只有BrdU抗體的1/500,很容易在細(xì)胞內(nèi)擴散;無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。
          本試劑適用于小鼠、大鼠及其它動物模型的各種組織器官的細(xì)胞增殖情況檢測。
          訂購信息

          產(chǎn)品名稱貨號規(guī)格價格
          EdU(動物注射)AC11L271
          2 mg680
          EdU  (動物注射)AC11L27210 mg1580

          產(chǎn)品組分

          產(chǎn)品組分試劑量規(guī)格
          EdU粉末2 mg20 T
          EdU粉末10 mg100 T

          運輸與保存
          常溫運輸。4℃保存,有效期12個月。
          使用方法
          本試劑盒適用于各種動物活體注射,穩(wěn)定性較好。注射標(biāo)記后可將目標(biāo)組織制備為石蠟或冰凍切片進(jìn)行EdU染色檢測。【注】:切片后可搭配EdU細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(李記貨號:AC11L251)使用,進(jìn)行后續(xù)的切片EdU染色檢測。
          動物實驗方法,以1cm×1cm切片為例
          實驗前須知:EdU的分子量為252.223,易溶于水,PBS,生理鹽水等溶液,便于動物注射使用。建議EdU的初始給藥量為5mg/kg,稀釋濃度為0.5-1mg/mL。具體動物模型的注射劑量可根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行調(diào)節(jié)。【注】:我們根據(jù)每只小鼠20g的體重為例,10mg EdU粉末可以注射100只小鼠(100T)。
          動物EdU注射
          【注】:①注射方式:依據(jù)實驗決定,如:腹腔注射、皮下注射、肌肉注射、尾靜脈注射等方式。
          ②標(biāo)記時間:最佳標(biāo)記時間依據(jù)具體實驗?zāi)康亩?,增殖快速的組織及器官采用短時間標(biāo)記(<12 h)(例如小腸),增殖速度慢的組織及器官可采用長時間標(biāo)記(如7 d或更長時間,例如大腦)。
          ③標(biāo)記濃度:最佳標(biāo)記濃度依據(jù)具體實驗而定。
          ④取樣部位:根據(jù)實驗?zāi)康亩?,一次?biāo)記可對多種組織和器官進(jìn)行組織切片。因小腸上皮組織增殖速度較快,標(biāo)記時間較短(動物注射6 d后取組織),建議預(yù)實驗可以取小腸組織檢測細(xì)胞增殖情況,作為陽性對照。
          切片處理
          1.切片前處理:組織器官先進(jìn)行清洗,以去除血液、組織或器官中殘留的EdU,降低背景。
          2.切片厚度:3-10um為宜,切片過厚可能影響切片背景。
          3.切片后處理:①石蠟切片脫蠟:二甲苯洗脫3次,每次10 min,乙醇梯度(100%,95%,85%,75%)脫水各1次,去離子水洗脫1次。②冰凍切片處理:室溫放置30 min后,4℃丙酮固定10 min,PBS清洗3次,每次5 min。
          4.2mg/mL 甘.an.suan清洗切片10 min。
          5.加入100uL 0.5% Triton X-100細(xì)胞通透劑,室溫孵育10 min,再用PBS清洗1次。
          后續(xù)進(jìn)行EdU染色步驟需要搭配EdU細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(李記貨號:AC11L251)進(jìn)行以下步驟:
          EdU染色
          1.通過用10:1去離子水稀釋反應(yīng)緩沖液,進(jìn)行配制1×反應(yīng)緩沖液。
          2.按照溶解200 mg緩沖添加劑溶于1 mL 去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配。
          【注】:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換。
          3.按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制:

          染色反應(yīng)液組分500 μL1 mL2 mL5 mL
          1X反應(yīng)緩沖液430 μL860 μL1.8 mL4.3 mL
          催化劑溶液20 μL40μL80 μL200 μL
          TAMRA紅色熒光溶液1.2 μL2.5 μL5 μL12.5 μL
          緩沖添加劑50 μL100 μL200 μL500 μL

          4.加入以上配置好的檢測混合液,以覆蓋組織為宜,避光、室溫孵育30 min。
          5.棄染色反應(yīng)液,加入300 μL 0.5% Triton X-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次,每次10 min。
          6.棄細(xì)胞滲透液,用PBS洗兩次,每次 5 min。
          其它染色(自備)
          (可選)可以根據(jù)實驗需要進(jìn)行細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)抗原的抗體染色。
          DNA染色
          1.將Hoechst 33342 *超級純*(李記貨號:AC12L021)PBS溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到1×Hoechst染色液。
          2.加入150 μL 1×Hoechst染色液,室溫避光孵育10-15 min后,棄染色液。
          3.PBS清洗細(xì)胞2-3次,去掉洗液。
          圖像獲取及分析
            建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4℃條件下避光濕潤保存3 d之內(nèi)完成拍照??墒褂每篃晒獯銣绶馄瑒┻M(jìn)行封片后于4℃條件下保存及拍照檢測。

          熒光染料最大激發(fā)波長最大發(fā)射波長熒光顏色
          TAMRA541 nm567 nm橘紅色熒光
          Hoechst 33342350 nm461 nm藍(lán)色熒光

          注意事項
          1.本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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          Hoechst 33342 *超級純*(貨號:AC12L021)
          抗熒光淬滅封片劑(貨號:AC28L532)

           

           



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