人慢性骨髓性白血病細(xì)胞 百歐博偉生物 細(xì)胞系

人慢性骨髓性白血病細(xì)胞 百歐博偉生物 細(xì)胞系

一、細(xì)胞簡(jiǎn)介

平臺(tái)編號(hào)：bio-73071

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

拉丁屬名：K-562

細(xì)胞名稱：K-562（人慢性髓原白血病細(xì)胞）

種屬：人

年齡（性別）：女；53歲

組織來源：骨髓；慢性骨髓性白血病(CML)

生長(zhǎng)特性：懸浮

細(xì)胞形態(tài)：淋巴細(xì)胞樣

細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細(xì)胞檢測(cè)：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

傳代方法：*建議1:2-1:3 兩天換液一次

凍存條件：90%FBS+10%DMSO

背景描述：連續(xù)細(xì)胞株K-562是由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。K-562細(xì)胞被歸入高度未分化的粒性白細(xì)胞類，Erson等對(duì)其表面膜性質(zhì)的研究表明，K-562細(xì)胞是一株人類紅白血病細(xì)胞。K-562細(xì)胞在自然殺傷分析中廣泛作為高敏感的體外受體，See Pross等將K-562細(xì)胞用于NK細(xì)胞的體外詳細(xì)檢測(cè)，包括NK細(xì)胞活性的數(shù)學(xué)量化。K-562母細(xì)胞是多能性造血惡性細(xì)胞，它能自發(fā)分化成可識(shí)別的紅血球祖細(xì)胞、粒性白細(xì)胞、單核細(xì)胞等。K-562細(xì)胞是EBNA陰性的。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基： IMDM(貨號(hào):PM150510)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃

二、細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程

1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；

2、鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉，加６-８ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；

3、取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存。

三、特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))

1、收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間長(zhǎng)不宜超過７２小時(shí))；

2、貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；

3、如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。

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