MatTek組織體外皮膚模型技術MatTekA3750

MatTek組織體外皮膚模型技術MatTekA3750

黑色素瘤模型由人類惡性黑色素瘤細胞（A375），正常的人源性表皮角質形成細胞（NHEK）和正常的人源性皮膚成纖維細胞（NHDF）組成，已培養(yǎng)形成多層，高度分化的表皮，黑色素瘤細胞位于CM惡性腫瘤的各個階段。在培養(yǎng)的不同階段，組織表現(xiàn)出放射狀生長期（RGP），垂直生長期（VGP）或轉移性黑素瘤表型。使用無血清培養(yǎng)基在細胞培養(yǎng)插入物上培養(yǎng)細胞，并在體外皮膚技術的前沿達到分化水平。從結構上講，黑色素瘤模型與體內黑色素瘤的進展密切相關，從而為研究，了解和開發(fā)針對嚴重的皮膚惡性腫瘤之一的預防和治療方法提供了有價值的工具。

黑色素瘤模型表現(xiàn)出均勻且高度可重復的體內樣形態(tài)和生長特征。這種全厚度皮膚模型的表皮由類似于體內發(fā)現(xiàn)的有組織的基底，棘突，顆粒狀和角質化表皮層組成。真皮隔室由膠原蛋白基質組成，該膠原蛋白基質含有活的正常人真皮成纖維細胞（NHDF）。

使用黑色素瘤組織的方案清晰明了。MatTek的黑色素瘤組織已與多種靶向和抗黑色素瘤藥物一起使用。全厚度黑色素瘤皮膚模型中的人類轉移性黑色素瘤細胞（A375）。A375細胞在真皮/表皮連接處發(fā)展為RGP黑色素瘤（第11天）。隨著培養(yǎng)時間的延長，黑色素瘤淋巴結呈VGP形態(tài)（第18天），隨后分離出的細胞簇侵入真皮（轉移性侵襲）（第29天）。

包含轉移性SK-Mel-28細胞的全層皮膚黑色素瘤模型（MLNM-FT）。S-100抗體染色。初，黑色素瘤細胞的小巢在真皮/表皮連接處形成（第11天）。后來出現(xiàn)VGP腫瘤（第25天），隨后觀察到轉移到真皮中（第29天）。長箭頭表示在表皮-真皮連接處的一些黑色素瘤細胞簇。短箭頭顯示單個黑色素瘤細胞浸潤真皮。

N-鈣黏著蛋白粘附分子在MLNM-FT-A375全厚度黑色素瘤皮膚模型中的表達。N-鈣黏著蛋白抗體染色，40X。注意隨著時間的流逝，N-鈣黏著蛋白表達水平增加。

組織：

試劑盒：全厚度黑素瘤皮膚構建物（MLNM-FT-A375試劑盒）由24個組織組成。（組織“套件”包含組織，少量培養(yǎng)基和塑料制品；有關特定套件的內容，請與MatTek聯(lián)系。）

底物：使用單孔組織培養(yǎng)板插入物（例如Millicell CM單孔組織培養(yǎng)板插入物，孔徑= 0.4 µm，表面積= 0.6 cm2）。

文化：初被淹沒，然后進入氣液界面。

組織學：上皮：8-12個上皮細胞層加上角質層（基底層，棘層和顆粒層）；真皮：含有成纖維細胞的膠原蛋白凝膠。在早期階段，黑素瘤細胞在真皮/表皮連接處形成淋巴結。在后期，黑素瘤發(fā)展為RGP（放射狀生長期），VGP（垂直生長期）并連續(xù)侵襲皮膚成分。

批號：每周生產的薄紙批被分配一個特定的批號。批號的末尾附加一個字母，以區(qū)分給定批組織中的各個試劑盒。批次內的所有組織試劑盒在細胞，培養(yǎng)基，處理，培養(yǎng)條件等方面都是相同的。

裝運：將組織在4攝氏度下在6孔板中的中等添加瓊脂糖凝膠上運輸。

發(fā)貨日：星期一。如有特殊要求，也可以在周四發(fā)貨。

交貨時間：周二上午，通過FedEx優(yōu)先服務（美國）。美國以外地區(qū)：星期二至星期四，具體取決于位置。

保質期：包括運輸時間在內，在使用前，可將組織在4°C下多保存3天。但是，除非有必要，否則不建議延長存儲時間。此外，如果在同一天（例如，星期二下午或在4°C下過夜存儲（星期三早晨）??）一致使用薄頁紙，則可獲可重復性。

實驗時間：對于黑色素瘤的發(fā)生和發(fā)展，可以持續(xù)長達4周的培養(yǎng)，并且保留了正常的表皮形態(tài)。必須每隔一天使用MatTek培養(yǎng)臺（MEL-STND；點擊此鏈接查看照片）以及5.0毫升MLNM-FT-MM進行培養(yǎng)。

替代紙巾：

MLNM-FT-A375（第6天）：早期MLNM-FT-A375組織。尚未在氣液界面上培養(yǎng)組織。客戶收到所需的媒體（MLNM-FT-GM）以繼續(xù)培養(yǎng)并生產MLNM-FT-A375。由于該產品的專有性，在訂購前需要與MatTek技術代表進行討論。專為研究黑色素瘤發(fā)展的早期階段而設計，其中實驗設計指示了早期組織的使用。

MLNM-FT-EXP：與MLMN-FT-A375相同，只是MatTek用客戶提供的黑色素瘤細胞替代了A375細胞。

細胞：

類型：人黑素瘤細胞（A375）；正常人表皮角質形成細胞（NHEK）；正常人皮膚成纖維細胞（NHDF）。

來源：惡性黑色素瘤細胞系（A375）；新生兒包皮組織（NHEK）；新生兒皮膚（NHDF）；

替代品：人惡性黑色素瘤細胞SK-Mel-28。

篩查： HIV，乙型肝炎，丙型肝炎，支原體。

介質：

基本培養(yǎng)基： MCDB 153基本培養(yǎng)基。

生長因子/激素：表皮生長因子，胰島素，和其他專有的表皮分化刺激劑。

血清：無。

抗生素：慶大霉素5 µg / ml（慶大霉素正常水平的10％）。

抗真菌劑：兩性霉素B 0.25 µg / ml。

pH指示劑：酚紅（0.0012 g / l）。

其他添加劑：用于增強表皮屏障形成的脂質前體（專有）。

分析/維護介質： MLNM-FT-MM用于MLNM-FT-A375組織的分析以及長期維護。

質量控制和無菌性：

目視檢查：目視檢查所有薄頁紙，如果發(fā)現(xiàn)物理缺陷，則拒絕運送薄紙。

終用途測試：將生產批次的組織保留下來，再培養(yǎng)7天，進行組織學固定和分析。

無菌：檢查整個生產過程中使用的所有介質的無菌性。將維持培養(yǎng)基在有或沒有抗生素的情況下孵育1周，并檢查其無菌性。還將用于運輸?shù)?4孔板的瓊脂糖凝膠孵育1周，并檢查是否有任何污染跡象。

病原體篩查：使用PCR對所有細胞進行篩查，并對HIV，乙型肝炎和丙型肝炎呈陰性。但是，沒有已知的測試方法可以*保證細胞不含病原體。因此，應按照CDC-NIH手冊“微生物和生物醫(yī)學實驗室的生物安全性”（1998年）中的建議，將這些產品和所有人類衍生產品的處理水平定為BSL-2級（生物安全級2級）或更高。有關更多幫助，請聯(lián)系您的站點安全員或MatTek技術服務。

批次失敗的通知：如果薄紙批次未通過我們的質量控制或無菌測試，則將通知客戶，并在適當時免費更換薄紙。由于我們的質量控制和無菌測試是在裝運后進行的，因此將盡快進行通知（在正常情況下，無菌故障將在裝運后的8天內通知）。