一、概述

890型BOD5自動(dòng)測(cè)定儀是利用空氣差壓法進(jìn)行生化需氧量測(cè)定的一種新型儀器。無(wú)汞BOD5自動(dòng)測(cè)定儀由于采用單片微機(jī)及良好的傳感測(cè)量技術(shù)，儀器能準(zhǔn)確提供與化學(xué)稀釋法可比的測(cè)定結(jié)果，并具有八通道BOD測(cè)量值（mg/L）直讀，實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)及生化反應(yīng)曲線(xiàn)可供打印，使用維護(hù)方便等優(yōu)點(diǎn)。是環(huán)保、石油化工、醫(yī)療衛(wèi)生、教學(xué)科研等領(lǐng)域，進(jìn)行水質(zhì)監(jiān)測(cè)的一種良好實(shí)用的分析儀器。

二、工作原理

   生化需氧量（BOD）,是指在特定條件下，通過(guò)水中需氧微生物的繁殖和和呼吸，分解水中有機(jī)物質(zhì)時(shí)所消耗溶解氧量。水中BOD值通常為樣品在20℃放置5天所消耗的溶解氧量（mg/L）,記為BOD5。在測(cè)量過(guò)程中，根據(jù)測(cè)量范圍選擇量程，將量定體積的水樣倒入培養(yǎng)瓶，放入溫度控制在20℃±1℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)，經(jīng)5天培養(yǎng)，樣品中的有機(jī)物經(jīng)過(guò)生物氧化作用，轉(zhuǎn)變成氮、碳和硫的氧化物。在這一過(guò)程中，從水樣中跑出來(lái)的*氣體二氧化碳被預(yù)先置入瓶中的氫氧化鈉（或氫氧化鉀）所吸收。因此，瓶中空氣壓力減少量與微生物所消耗的溶解氧量成正比，通過(guò)測(cè)量其壓力變化即可得到BOD5值。增加或減少所取樣品的量可以增加或降低壓力減少值，這樣操作者比較容易在很寬的范圍準(zhǔn)確測(cè)量BOD5值。培養(yǎng)瓶中壓力的變化是由半導(dǎo)體壓差傳感器來(lái)檢測(cè)的，經(jīng)過(guò)信號(hào)放大和單片機(jī)的運(yùn)算處理，由LED顯示器循環(huán)顯示八通道的BOD測(cè)量值，打印機(jī)可打印實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可打印完整的BOD5生化反應(yīng)曲線(xiàn)。

三、主要技術(shù)指標(biāo)

1、 直接測(cè)量范圍：0～1000mg/L(超過(guò)此范圍時(shí)需要稀釋)

2、 同時(shí)測(cè)量樣品數(shù)：8

3、 準(zhǔn)確度：符合國(guó)標(biāo)“GB7488-87”規(guī)定（葡萄糖谷氨酸標(biāo)液BOD5值在180～230mg/L范圍內(nèi)）

4、 顯示：9位LED數(shù)碼管分別顯示通道號(hào)、BOD測(cè)量值（mg/L）和運(yùn)行時(shí)間（h）

5、打?。簷C(jī)內(nèi)微打可打印實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可打印完整的生化反應(yīng)曲線(xiàn)

6、 電源：AC 220V±10%

7、 功耗：≤25W

8、 環(huán)境條件：環(huán)境溫度0～40℃

            相對(duì)濕度≤80％

四、儀器構(gòu)成

儀器由主機(jī)、副機(jī)、培養(yǎng)瓶等組成，同時(shí)配置生化培養(yǎng)箱即可完成BOD5全過(guò)程實(shí)驗(yàn)。其中主機(jī)包括單片微機(jī)系統(tǒng)、LED顯示器、打印機(jī)及操作鍵盤(pán)等，副機(jī)包括半導(dǎo)體壓差傳感器、放大器、磁力攪拌器以及管路系統(tǒng)。

五、安裝和使用

（一）準(zhǔn)備工作

1、開(kāi)箱檢查，按裝箱清單核對(duì)主機(jī)、副機(jī)及附件是否齊全。

2、檢查實(shí)驗(yàn)電源是否符合儀器的技術(shù)要求，必要時(shí)應(yīng)使用交流穩(wěn)壓器。

3、為確保安全和儀器正常工作，電源插座必須提供可靠的接地線(xiàn)。

（二）主機(jī)面板及功能鍵的使用

主機(jī)由九只數(shù)碼管構(gòu)成三個(gè)顯示窗，運(yùn)行時(shí)分別顯示通道號(hào)、BOD測(cè)量值（mg/L）和

運(yùn)行時(shí)間（h），而在設(shè)置參數(shù)時(shí)則另有定義（詳見(jiàn)以下條目）。鍵盤(pán)由十個(gè)功能鍵和十個(gè)數(shù)字鍵組成，其中左側(cè)的八個(gè)功能鍵上方設(shè)有八個(gè)發(fā)光管，發(fā)光時(shí)提示當(dāng)前的操作，以此也可判斷儀器處于何種工作狀態(tài)。

1、啟動(dòng)：所有參數(shù)設(shè)置完畢，在復(fù)位狀態(tài)下按此鍵，儀器進(jìn)入運(yùn)行狀態(tài)開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

2、復(fù)位：在儀器運(yùn)行時(shí)（即在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中）按此鍵，將終止此次實(shí)驗(yàn)，并清除已存

的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（注意：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后按此鍵，則不再提供數(shù)據(jù)和曲線(xiàn)的打?。?；在設(shè)置參數(shù)過(guò)程中按此鍵，此時(shí)經(jīng)回車(chē)確認(rèn)的已輸入?yún)?shù)將被存儲(chǔ)，并回到復(fù)位狀態(tài)準(zhǔn)備進(jìn)行其它操作。

   3、調(diào)校：生產(chǎn)廠(chǎng)調(diào)試、校準(zhǔn)和維修。

4、接種：按此鍵顯示器顯示“P-”和已存儲(chǔ)接種百分比數(shù)值，配合數(shù)字鍵和回車(chē)鍵可輸入新的樣品接種液的百分比數(shù)值。

5、量程：按此鍵顯示器顯示“L-”，連續(xù)按此鍵可分別顯示1～8通道已存儲(chǔ)的量程設(shè)置值，配合數(shù)字鍵和回車(chē)鍵可設(shè)置新的各通道的量程值。儀器可供選擇的量程值有20、100、300、500、800和1000計(jì)6種，若輸入有誤，計(jì)算機(jī)無(wú)法采納會(huì)顯示“Err”,此時(shí)應(yīng)復(fù)位后重新輸入。

6、時(shí)間：按此鍵顯示器顯示“t-” 和已存儲(chǔ)的運(yùn)行時(shí)間設(shè)置值,配合數(shù)字鍵和回車(chē)鍵可輸入新的實(shí)驗(yàn)時(shí)間，BOD5則設(shè)定為120(h)。

7、時(shí)鐘：按此鍵顯示器顯示“C-1”和兩位實(shí)時(shí)時(shí)鐘數(shù)值，C-1～C-5分別代表年、月、日、時(shí)、分。連續(xù)按此鍵可逐一查看時(shí)鐘值，配合數(shù)字鍵和回車(chē)鍵可校準(zhǔn)時(shí)鐘。

8、打印：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中按此鍵，顯示器顯示“P  d-”,此時(shí)按通道號(hào)并按回車(chē)鍵，可打印該通道每隔兩小時(shí)采集的BOD數(shù)據(jù)，如直接按回車(chē)則打印全部通道每隔兩小時(shí)采集的BOD數(shù)據(jù)；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后按此鍵，顯示器顯示“P  A-”，同樣操作可打印單一通道或全部通道9通7890完整的生化反應(yīng)曲線(xiàn)（包括zui終數(shù)據(jù)）。若還須打印每隔兩小時(shí)采集的BOD全部數(shù)據(jù)，只要再按一下打印鍵，回到“P  d-”界面即可操作。

9、清除：輸入?yún)?shù)時(shí)，一旦輸錯(cuò)數(shù)字按此鍵可以清除錯(cuò)誤數(shù)據(jù)；實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，按此鍵可終止主機(jī)蜂鳴器鳴叫。

10、回車(chē)：設(shè)置參數(shù)時(shí)，須按此鍵確認(rèn)輸入數(shù)據(jù)有效；在運(yùn)行時(shí)按此鍵可快速切換通

道查看BOD實(shí)時(shí)值。

   (三)、儀器安裝與系統(tǒng)性檢查

1、接通培養(yǎng)箱電源，將培養(yǎng)箱上溫度選擇開(kāi)關(guān)撥至“設(shè)置”位置，調(diào)節(jié)溫度設(shè)置旋鈕，使表頭溫度指示為20℃，然后再將溫度選擇開(kāi)關(guān)撥至“測(cè)量”位置，按生化培養(yǎng)箱說(shuō)明書(shū)檢查其工作是否正常，當(dāng)控制溫度為20℃時(shí)，恒溫精度應(yīng)滿(mǎn)足20℃±1℃的使用要求。

2、將廠(chǎng)方提供的連接電纜連接到儀器主機(jī)后側(cè)的插座，另一端則連接到培養(yǎng)箱后側(cè)的插座。把副機(jī)放進(jìn)培養(yǎng)箱，將箱內(nèi)提供（與主機(jī)已連通）的電纜插頭與副機(jī)連接好，接通主機(jī)電源（按下復(fù)位鍵），儀器應(yīng)顯示“good”字樣。

3、按照“主機(jī)面板及功能鍵的使用”章節(jié)中所述，分別對(duì)接種、量程、時(shí)間和時(shí)鐘的設(shè)置數(shù)據(jù)進(jìn)行修改或確認(rèn)，關(guān)閉電源后再重新打開(kāi)電源，更改后的數(shù)據(jù)應(yīng)能正確存儲(chǔ)。長(zhǎng)期未用的儀器在進(jìn)行此項(xiàng)檢查時(shí)，應(yīng)先通電一段時(shí)間以便給機(jī)內(nèi)電池充電，否則數(shù)據(jù)可能丟失。

4、按下啟動(dòng)鍵，儀器應(yīng)能循環(huán)顯示1～8通道的BOD測(cè)量值（這時(shí)應(yīng)在0值附近）。

5、任取一只培養(yǎng)瓶加入適量自來(lái)水，傾斜約45°放入攪拌子，將瓶子依次放到副機(jī)的8個(gè)實(shí)驗(yàn)位置上，應(yīng)能觀(guān)察到攪拌子轉(zhuǎn)動(dòng)，水面有漩渦。

6、以上各項(xiàng)檢查均正常即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

六、分析方法與步驟

（一）、四種無(wú)機(jī)鹽的制備

取4只1000ml清洗干凈的容量瓶備用。

1、緩沖液

用蒸餾水溶解下列試劑并稀釋到1000ml

(1)、21.75g磷酸氫二鉀(K2HPO4)

(2)、8.5g磷酸二氫鉀(KH2PO4)

(3)、33.4g磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O濕度在61.07％～80.51％穩(wěn)定）

(4)、1.7g氯化銨（NH4Cl）

2、硫酸鎂溶液

在蒸餾水中溶解22.5g硫酸鎂（MgSO4·7H2O）并稀釋至1000ml.

3、氯化鈣溶液

在蒸餾水中溶解27.5g氯化鈣（CaCl2）并稀釋至1000ml.

4、三氯化鐵溶液

在蒸餾水中溶解0.25g三氯化鐵（FeCl3·6H2O）并稀釋至1000ml。

（二）樣品BOD5的測(cè)量

1、預(yù)估被測(cè)樣品的BOD5值的范圍，選擇接近量程。如無(wú)法預(yù)估，可先測(cè)定該樣品的COD值，并以此確定量程（通常樣品的BOD5值為該樣品的COD值的0.8倍。對(duì)BOD5值在1000mg/L以下，含有足夠需氧微生物的樣品，不需接種，可以直接根據(jù)選定的測(cè)量范圍，從取水樣量表中查得取樣量。根據(jù)所測(cè)樣品數(shù)量的多少（zui多8個(gè)）來(lái)確定用幾個(gè)培養(yǎng)瓶測(cè)定其中一個(gè)樣品。如果只有兩個(gè)水樣，可選擇2～4個(gè)培養(yǎng)瓶測(cè)定其中一個(gè)水樣。預(yù)估該樣品的BOD5值的范圍，確定每個(gè)瓶的取水樣量，從而確定幾個(gè)培養(yǎng)瓶所需總的取樣量。將該水樣放在一個(gè)大燒杯中（1000ml～2000ml），按每1000ml水樣各加入四種無(wú)機(jī)鹽各1ml。將燒杯放到培養(yǎng)箱內(nèi)副機(jī)的任一實(shí)驗(yàn)位置上攪拌恒溫2～3小時(shí)。同時(shí)必須調(diào)節(jié)該水樣的pH值在6.7～7.5之間（理想值為pH7.2）。如超出此范圍，可用適當(dāng)濃度的氫氧化鈉或硫酸中和。然后用量筒按確定好的取樣量量取水樣倒入培養(yǎng)瓶中。

             取水樣量表（出廠(chǎng)時(shí)按培養(yǎng)瓶體積填上實(shí)際值）

2、每只培養(yǎng)瓶中放入1只攪拌子，培養(yǎng)瓶放在副機(jī)的實(shí)驗(yàn)位置上，注意培養(yǎng)瓶號(hào)與副

機(jī)上標(biāo)注的通道號(hào)相吻合，確保設(shè)置值、測(cè)量值與實(shí)際樣品的準(zhǔn)確對(duì)應(yīng)關(guān)系。經(jīng)加溫?cái)嚢?，直至水樣溫度達(dá)到20℃±1℃（約需1～2小時(shí)）。

3、取8只清洗干凈的密封杯，杯中放入占總高度約1/4的固體NaOH或KOH(或5～

6粒NaOH顆粒)，將密封杯與瓶口及連接頭接觸的兩個(gè)面涂上薄薄的真空硅脂，然后置于每個(gè)瓶口。將與軟管連接的瓶蓋在培養(yǎng)瓶上旋緊，同時(shí)將副機(jī)上8只參考?xì)鈮簜}(cāng)的密封螺栓旋緊，此過(guò)程切不可讓NaOH或KOH掉入培養(yǎng)液中。

4、按照前面所述，在復(fù)位狀態(tài)下足一檢查核對(duì)時(shí)鐘、時(shí)間、量程的設(shè)置值是否準(zhǔn)確無(wú)

誤。如不需接種，應(yīng)將接種設(shè)置值設(shè)置為0，此為非接種模式，1～8通道全部作為樣品直接測(cè)量。如此時(shí)接種設(shè)置值不為0，則定義為接種模式，勢(shì)必造成計(jì)算錯(cuò)誤。

  5、接種設(shè)置。有些樣品微生物不足需進(jìn)行接種（具體操作見(jiàn)“接種”一節(jié)），這里要求所有樣品的接種比例*,并規(guī)定接種水與樣品同時(shí)進(jìn)行平行樣實(shí)驗(yàn)，且接種水必須放在第1通道。如該批樣品的接種比例為10％，按下接種鍵，輸入數(shù)字鍵1、0后再按回車(chē)鍵確認(rèn)，顯示器出現(xiàn)“End“字樣。復(fù)位后再按接種鍵，確認(rèn)輸入無(wú)誤。

  6、至此可復(fù)位后按啟動(dòng)鍵，開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，直到設(shè)定時(shí)間完成后，儀器自動(dòng)終止數(shù)據(jù)采集，并在時(shí)間顯示窗口顯示“End”字樣，機(jī)內(nèi)蜂鳴器鳴叫提示實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

  7、此時(shí)按下清除鍵，終止蜂鳴器鳴叫，再按打印鍵，可打印單一通道或全部通道的完整的生化反應(yīng)曲線(xiàn)或數(shù)據(jù)。

  8、儀器具有掉電保護(hù)功能，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如遇突然停電，所有數(shù)據(jù)都不會(huì)丟失。來(lái)電時(shí)顯示窗口短暫顯示“run”后，儀器自動(dòng)恢復(fù)運(yùn)行而無(wú)須人工干預(yù)（停電時(shí)間過(guò)長(zhǎng)則可能影響測(cè)量結(jié)果）。

  9、儀器一旦啟動(dòng)，不得再按復(fù)位鍵。如因特殊情況須取消本次實(shí)驗(yàn)可復(fù)位，但運(yùn)行的數(shù)據(jù)將丟失，如果是啟動(dòng)時(shí)間不長(zhǎng)（如2小時(shí)以?xún)?nèi)），尚可重新啟動(dòng)繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，否則應(yīng)終止本次實(shí)驗(yàn)。

（三）、測(cè)定數(shù)據(jù)的處理

    1、對(duì)于未經(jīng)稀釋處理的樣品，在所設(shè)量程范圍內(nèi)（允許超量程20％），儀器測(cè)量值

就是BOD5值。對(duì)于稀釋處理的樣品，只需將測(cè)量值乘以稀釋倍數(shù)即為BOD5值。

   （四）、標(biāo)準(zhǔn)樣品的實(shí)驗(yàn)方法

    1、制備稀釋水

    取一只2000ml燒杯，用量筒量取2000ml蒸餾水倒入燒杯中，在燒杯中加入四種無(wú)機(jī)鹽各2ml，即為稀釋水。

    2、在2000ml稀釋水中溶解300mg葡萄糖（C6H12O4）和300mg谷氨酸（如實(shí)驗(yàn)室用葡萄糖因其帶一個(gè)結(jié)晶水，故葡萄糖應(yīng)稱(chēng)量330mg）。在燒杯中放一攪拌子，將燒杯放到培養(yǎng)箱內(nèi)副機(jī)的實(shí)驗(yàn)位置上，恒溫?cái)嚢?/span>2～3小時(shí)。注意：這種標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在每次使用前新鮮配置。

    3、用1000ml燒杯取新鮮的生活污水作為接種液，將燒杯放到培養(yǎng)箱內(nèi)副機(jī)的實(shí)驗(yàn)位置上，與標(biāo)準(zhǔn)樣品同時(shí)恒溫2～3小時(shí)。

    4、待標(biāo)準(zhǔn)樣品全部溶解后，用量筒倒出200ml，再用量筒取200ml生活污水倒入標(biāo)準(zhǔn)樣品中。接種后的標(biāo)準(zhǔn)樣品仍放到培養(yǎng)箱內(nèi)副機(jī)的實(shí)驗(yàn)位置上恒溫?cái)嚢?/span>1～2小時(shí)。

    5、按“取水樣量表”0～300mg/L測(cè)量范圍給定的取水樣量，量取接種后的標(biāo)準(zhǔn)樣品，分別倒入7只培養(yǎng)瓶中，并放在副機(jī)2～8通道規(guī)定位置。再按0～100mg/L測(cè)量范圍給定的取水樣量，量取生活污水倒入1只培養(yǎng)瓶，放在副機(jī)*通道位置進(jìn)行平行樣測(cè)定。然后按前述“樣品BOD5的測(cè)量”第3～9條進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

    6、如果2～8通道測(cè)量結(jié)果在180～230mg/L范圍內(nèi)，則表明儀器所用的方法是適當(dāng)?shù)?，結(jié)果正確。若測(cè)量結(jié)果超出上述范圍，就要檢查儀器的性能、操作步驟和方法以及接種水是否符合要求（參見(jiàn)下節(jié)“影響BOD5測(cè)定的因素”）。

（五）、影響BOD5測(cè)定的因素

1、溶解氧

冬季所取的樣品由于實(shí)驗(yàn)溫度設(shè)在20℃，使得溶解氧過(guò)飽和，而夏季所取的樣品在20℃時(shí)溶解氧可能欠飽和。在BOD5測(cè)定前應(yīng)對(duì)這些樣品進(jìn)行攪拌和曝氣，以便使溶解氧調(diào)節(jié)到20℃飽和點(diǎn)左右。

2、pH值

應(yīng)調(diào)節(jié)樣品水的pH值在6.7～7.5之間（理想值為pH7.2），如果超出此范圍，含有大

量酸和堿的樣品水，測(cè)量值可能會(huì)低于實(shí)際含量。

3、 溫度

儀器規(guī)定必須在20℃±1℃的溫度條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，超出此范圍，也會(huì)影響測(cè)量結(jié)果。

因此，在實(shí)驗(yàn)前必須對(duì)樣品進(jìn)行20℃±1℃的恒溫預(yù)處理，冬夏季節(jié)溫度偏離較多時(shí)，應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)預(yù)處理時(shí)間。

4、稀釋

如果試驗(yàn)樣品的BOD5預(yù)估值超過(guò)1000mg/L,可用稀釋水稀釋樣品。所加的稀釋水也

應(yīng)保持為20℃，并曝氣使溶解氧達(dá)到飽和。

5、接種

   （1）接種的意義

BOD5實(shí)驗(yàn)，要求水樣含有供生物氧化的有機(jī)物和適量氧化有機(jī)物的需氧細(xì)菌，以及

吞食有機(jī)物和增進(jìn)需氧細(xì)菌生長(zhǎng)的其它微生物。如果水樣中根本沒(méi)有或幾乎沒(méi)有這類(lèi)微生物，就必須對(duì)水樣按一定比例加入這類(lèi)微生物溶液。這個(gè)過(guò)程就叫接種。

與一般生活污水不同，工業(yè)廢水可能不含有足夠量的細(xì)菌和微生物，以供樣品中所含有機(jī)物*生化分解，因此測(cè)定此類(lèi)樣品，應(yīng)進(jìn)行接種。即便是生活污水，如果其中含有酚、甲醛和其它抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的物質(zhì)，不僅不能作為接種液使用，且其自身BOD5測(cè)量也有必要進(jìn)行接種。

（2）、接種液的制備

用于接種的溶液為20℃放置24～36小時(shí)未經(jīng)處理，含有足夠量的細(xì)菌和微生物的新鮮生活污水上清液。在下次實(shí)驗(yàn)時(shí)，若要使用以前測(cè)定的水樣作為接種液，要經(jīng)濾紙過(guò)濾，這種慮液在20℃條件下避光保存，zui多可使用兩個(gè)月。

（3）、非接種模式下的接種

將準(zhǔn)備測(cè)定的樣品放入培養(yǎng)瓶中，使用吸管將2～5滴接種液（根據(jù)樣品量）加到樣品中，按下接種鍵，將接種設(shè)置值設(shè)為0（8通道全部作為樣品測(cè)量），按步驟測(cè)定BOD5。因?yàn)樗拥慕臃N液實(shí)在是太少，*可以忽略其影響，zui終測(cè)量值可視為樣品的實(shí)際BOD5值。

（4）、接種模式下的接種

如果非接種模式下的接種不能引起水樣中有機(jī)物的分解，應(yīng)增加接種量，采用接種模式下的接種。這時(shí)應(yīng)將接種液與樣品同時(shí)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行平行樣測(cè)定與計(jì)算。接種量常取1％，5％，10％。

環(huán)境保護(hù)、水質(zhì)監(jiān)測(cè)、農(nóng)林土壤、教學(xué)科研等