人胰腺癌細胞；MIAPaCa-2價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱  人胰腺癌細胞；MIAPaCa-2價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞表達人集落刺激因子CFS-I和血漿酶原激活劑

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 PN5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR AMEL:X,X；CSF1PO:10,10；D12S391:19,19；D13S317:12,
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
anti-PDI/FITC 熒光素標記蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Avidin/FITC 熒光素標記親合素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

表皮生長因子受體抗體 Anti-EGF-R 0.1ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml

FAF1 英文名稱： Fas相關(guān)1因子抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 規(guī)格 0.1ml

Avidin/FITC 熒光素標記親合素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
SHBG ELISA Kit 大鼠性激素結(jié)合球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti- Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽1-42 (C端抗體)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FOXO1 叉頭蛋白O1抗體 規(guī)格 0.1ml

IL-2(Human Interleukin 2) ELISA kit 人白介素2 96T

Nck1 英文名稱： NCK銜接蛋白1抗體 0.2ml

ADAMTS2 英文名稱： 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶2型抗體 0.2ml

Anti- Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽1-42 (C端抗體)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

TRAb ELISA Kit 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體 96T

ASP4 英文名稱： 天冬酸蛋白酶ASP4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 人可溶性蛋白185Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

BRN3B 英文名稱： 腦特定蛋白Brn3B抗體 0.1ml

Anti-SLC16A3/MCT-4 MCT4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit 人血漿抗凝蛋白CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HDBP2/PTTG1IP 瘤病毒調(diào)控因子1抗體(鋅指蛋白395) 規(guī)格 0.2ml

AQP-2 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2 96T

P51A 英文名稱： 抑制基因p63α抗體 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr93) 英文名稱： 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml

Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml